过敏性鼻炎患者外周血CD4+CXCR5+T细胞表面SLAM的变化及其调控作用的研究

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目的:通过检测过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血中CD4+CXCR5+T细胞比例及其表面分子SLAM(signaling lymphocyticactivation molecule)和下游衔接蛋白SAP(SLAM-associated protein)表达的变化,研究SLAM分子对CD4+CXCR5+T细胞的影响,初步探讨SLAM在过敏性鼻炎致病过程中可能发挥的作用。  方法:  1.分离人外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测AR患者和健康对照者外周血中CD4+CXCR5+T细胞占CD4+T细胞的比例。  2.流式细胞术检测AR患者和健康对照者CD4+CXCR5+T细胞表面SLAM和其下游衔接蛋白SAP的表达。同时检测CD19+B细胞表面SLAM的表达。  3.ELISA法检测AR患者和健康对照者血浆中IgE水平,分别分析AR患者CD4+CXCR5+T中SLAM和SAP表达量与血浆IgE的相关性。  4.免疫磁珠法分选人外周血中CD4+CXCR5+T细胞,分别用抗SLAM抗体和同型IgG蛋白处理,48小时后ELISA法检测培养上清中IL-21的水平。  5.ELISA法检测AR患者和健康对照者血浆中IL-21的水平。分别分析血浆IL-21水平与CD4+CXCR5+T中SLAM、SAP表达量的相关性,以及血浆IL-21与IgE表达的相关性。  结果:  1.与健康对照者相比,AR患者外周血中,CD4+CXCR5+T细胞占CD4+T细胞的比例没有明显差异(16.50±1.1190% vs15.4±0.8521%)。  2.与健康对照者相比,AR患者CD4+CXCR5+T细胞表面SLAM以及其下游衔接蛋白SAP的表达水平都明显降低(SLAM的平均荧光强度:61.81±2.937 vs51.25±2.162,P<0.01;SAP的平均荧光强度:53.18±1.990 vs46.33±2.391,P<0.05),且二者呈正相关(r=0.4684,P=0.0242)。  3.与健康对照相比,AR患者CD19+B细胞占淋巴细胞百分比升高(7.928±0.5848%vs10.66±0.7986%,P<0.05),但CD19+B细胞表面SLAM的表达明显降低(SLAM的平均荧光强度:53.17±4.863 vs39.23±2.361,P<0.05),CD4+CXCR5+T细胞表面SLAM与CD19+B细胞表面SLAM的表达之间无明显相关性(r=0.0441,P=0.8493)。  4.与健康对照相比,AR患者血浆IgE水平明显上升(144.5±6.032 vs311.1±67.39μg/mL,P<0.05),患者血浆IgE水平与CD4+CXCR5+T细胞中SLAM和SAP的表达量分别呈负相关(r=-0.4448,P=0.0335; r=-0.4369, P=0.0371)。  5.与健康对照组相比,AR患者血浆IL-21的水平显著上升(63.93±3.809 vs86.42±5.227 pg/mL,P<0.01)。且血浆IL-21与CD4+CXCR5+T细胞上SLAM和SAP的表达量均呈负相关(r=-0.3245,P=0.0360; r=-0.3805,P=0.0129)。血浆IL-21与IgE的表达呈明显正相关(r=0.3374,P=0.0289)。  6.与同型IgG相比,用抗SLAM抗体刺激人外周血中CD4+CXCR5+T细胞后,培养上清中IL-21水平明显降低(130.4±17.23 vs67.47±9.91 pg/mL, P<0.05)。  结论:  1.过敏性鼻炎患者外周血CD4+CXCR5+T细胞中SLAM及SAP的表达均显著降低,且两者呈正相关;同时B细胞表面SLAM的表达也明显降低。且CD4+CXCR5+T细胞SLAM及SAP的表达与血浆IgE水平呈负相关,能从一定程度上提示疾病状态。  2.过敏性鼻炎患者血浆IL-21水平明显高于健康对照者,并且IL-21水平与CD4+CXCR5+T细胞上SLAM和SAP的表达量均呈显著负相关,体外抗SLAM抗体能够下调CD4+CXCR5+T细胞分泌IL-21。提示SLAM可能通过影响CD4+CXCR5+T细胞分泌IL-21,在过敏性鼻炎的致病过程中发挥作用。
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