醋炙乌药指纹图谱的构建及对寒凝气滞模型大鼠的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hantao2007
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乌药Lindera aggregate(Sims)Kosterm.为樟科山胡椒属植物乌药的干燥块根,是我国传统中药,也是我省大宗药材之一。其炮制品在临床上应用广泛,但对于醋炙乌药质量控制和“行气”功效的研究少有报道。本文将以醋炙乌药为研究对象,构建其指纹图谱以明确质量控制标准;并利用寒凝气滞胃实寒动物模型探讨醋炙乌药“行气”功效对于胃排空及胃肠激素的影响,本论文主要完成以下研究工作:1不同产地醋炙乌药指纹图谱的建立及模式识别研究目的:采用HPLC法建立不同产地醋炙乌药的指纹图谱,并结合相似度计算和化学模式识别方法,评价醋炙乌药质量。方法:采用Agilent 5 HC-C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.05%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长235 nm,柱温(25±5)℃,进样10μL。采用中药指纹图谱相似度软件对醋炙乌药进行测定,计算相似度。再将数据导入SIMCA13.0软件并进行主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares discriminate analysis,OPLS-DA)。结果:建立了醋炙乌药HPLC指纹图谱;中药指纹图谱相似度软件评价醋炙/生乌药之间相似度,可得醋炙/生乌药之间相似度均在0.510.70,表明醋炙/生乌药差异性较大;PCA可将醋炙/生乌药基本上分为两类;OPLS-DA筛选差异标记物,确定差异贡献最大的3个成分为去甲异波尔定、乌药内酯、乌药醚内酯。结论:该方法为醋炙乌药质量控制提供了方法依据,同时结合化学模式识别研究有助于乌药炮制前后整体质量控制及质量评价。2醋炙乌药“行气”功效对于寒凝气滞模型大鼠的影响目的:探讨醋炙乌药对寒凝气滞胃实寒模型大鼠胃排空率、小肠推进率和胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸鸟苷(cGMP)比值的影响。方法:将70只SD大鼠随机分为空白组(n=10)和造模组(n=70),采用寒冷刺激法造模7 d。将造模成功后的大鼠随机分为模型组、乌药组、醋炙乌药低、中、高剂量组和多潘立酮组,连续给药3 d。采用酚红含量法检测各组大鼠的胃排空率和小肠推进率;采用ELISA法检测其血清中MTL、GAS、cAMP、cGMP含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠胃排空及小肠推进率显著下降,血清中cAMP、cAMP·cGMP-1、MTL、GAS含量显著降低和cGMP含量升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与生乌药组比较,醋炙乌药各组大鼠胃排空及小肠推进率显著提高,血清中cAMP、cAMP·cGMP-1、MTL、GAS含量显著升高(P<0.05)。结论:醋炙乌药能促进胃排空及肠推进,并能增加大鼠血清中MTL、GAS水平及调高cAMP·cGMP-1比值。
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