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马慢病毒受体1(Equine Lentivirus Receptor-1，ELR1)是Zhang等在2005年通过克隆表达技术发现的马传染性贫血病毒(Equine Infectious Anemia Virus，EIAV)的细胞受体,根据其序列特征将其归属于肿瘤坏死因子受体(Tumour necrosis Factor Receptor, TNFR)蛋白家族。与同为慢病毒的猫、猴和人免疫缺陷病毒利用两个共同受体来感染细胞不同,ELR1是EIAV感染靶细胞的单一功能性受体。为了进一步阐述EIAV的致病机理,本文主要应用蛋白结晶学方法,通过对与病毒结合的ELR1胞外区(ELR1-T)进行体外原核表达和真核表达以及结晶试验,为该受体主要功能区蛋白质晶体的X-射线衍射、蛋白结构解析和结构与功能研究打下了良好的基础。本研究主要的结果如下：1、ELR1基因的序列分析：通过二级结构的软件分析,将ELR1基因的全序列分为信号肽、胞外区、跨膜区和胞内区。2、ELR1表达载体的构建：本研究将ELR1基因的胞外区(Truncated ELR1，ELR-T)克隆到表达载体pET-30 His-MBP上,构建成重组质粒pET30-ELR1-T。经过测序鉴定后,将pET30-ELRl-T质粒转化E.coli Rosetta感受态细胞诱导表达重组ELR1-T蛋白。3、表达系统的选择：首先试用原核表达系统,以ELR1-T与His-MBP融合双标签融合形式,表达该重组蛋白。经SDS-PAGE电泳检测,虽然检测出与双标签His-MBP融合的重组ELR1-T蛋白有表达,但将该融合蛋白的His-MBP双标签切除后,蛋白发生沉淀。之后尝试了真核表达系统中的昆虫杆状病毒表达系统表达目的蛋白,分别进行了胞内表达和胞外分泌表达。4、重组ELR1-T蛋白的纯化：经昆虫杆状病毒表达系统分泌表达得到的蛋白上清经Amicon Stirred Cell搅拌式超滤装置系统进行样品的前期浓缩处理,将处理后的上清经过高亲和Ni-NTA Resin初步纯化,再采用凝胶过滤层析方法进行纯化。经SDS-PAGE电泳检测,纯化后的ELR1-T蛋白呈单一条带,即已高纯化,可用于结晶试验。5、重组ELR1-T蛋白的晶体生长研究：采用气相扩散法进行晶体的筛选,在Hampton Research公司的Crystal Screen2的31#、39#、44#和Index的52#条件下生长出微晶体,这为最终获得高质量晶体,应用X-射线衍射进行ELR1蛋白的三维构象分析,奠定了重要基础。