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目的:白介素-17A(Interleukin-17A,IL-17A)是一种具有强效促炎作用的细胞因子,参与包括获得性和自身免疫性在内的多种炎症反应性疾病。最近的研究表明,IL-17A在脓毒症(Sepsis)和博来霉素(Bleomycin,BLM)导致的急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)中具有重要作用,而在急性PQ中毒致肺损伤中的作用如何尚无报道。本研究旨在探究IL-17A在百草枯(Paraquat,PQ)中毒致ALI中的作用及其可能途径。 研究方法:将180只雌性小鼠随机平均分为9组:生理盐水对照组(NS),PQ中毒组(PQ,4组),抗体组(PQ+Ab,4组)。PQ和PQ+Ab组采用一次性灌胃25mg·kg-1 PQ溶液建立PQ中毒小鼠模型,PQ+Ab组小鼠灌胃PQ溶液2h后经腹腔一次性注射5mg·kg-1 IL-17A中和性抗体,PQ组给予等量体积的生理盐水,NS组分别给予等量体积的生理盐水。PQ组与PQ+Ab组分别于染毒8h、24h、48h、72h时各取存活小鼠处死,NS组于24h时处死,分别留取外周血清、支气管-肺泡灌洗液(Broncho-alveolar Lavage Fluid,BALF)和肺组织标本。苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin,HE)染色法观察各组小鼠肺病理学改变并评分,测定小鼠肺组织湿干比重(W/D),用Bradford法测定BALF总蛋白含量以评定肺组织的损伤;酶联免疫吸附法(Enzyme-linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)测定BALF中IL-17A以及血清中IL-17A、IL-6、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)的水平变化,自动血球分析仪检测BALF白细胞总数与中性粒细胞百分比,免疫组化染色(Immunohistochemical,IHC)法检测IL-17A在肺组织中的表达水平及肺组织中核转录因子-κ B p65(Nuclear Factor-κ B p65,NF-κB p65)核转位,q-PCR法检测IL-17A mRNA在肺组织中的表达水平。 结果:NS组无小鼠死亡,染毒后,PQ组和PQ+Ab组小鼠72h内分别累计死亡18只和13只;与NS组比较,PQ与PQ+Ab组小鼠肺W/D明显升高(P<0.001),肺HE染色光学显微镜下呈现ALI的病理性改变,血清IL-17A、IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05),BALF中IL-17A水平升高、总蛋白含量增多、白细胞总数及中性粒细胞百分比均明显升高(P<0.05);同时,肺组织中IL-17A mRNA的表达水平升高(P<0.05),IHC检测显示IL-17A在肺组织中呈阳性表达并且NF-κBp65在肺组织中呈核转位阳性。与PQ组比较,PQ+Ab组小鼠,肺W/D明显降低(P<0.001)、肺组织病理损伤减轻(P<0.05),血清中IL-17A、IL-6、TNF-α水平较PQ组明显降低(P<0.05),BALF中的IL-17A水平显著降低(P<0.001)、总蛋白含量减少(P<0.05)、白细胞总数及中性粒细胞的百分比明显减少(P<0.05),同时,NF-κB p65的IHC评分明显降低(P<0.001),IL-17A mRNA的表达与IL-17AIHC评分在24h、48h、72h时明显降低(P<0.05)。 结论: IL-17A参与并促进急性PQ中毒引起的肺损伤,该作用可能是通过募集中性粒细胞直接损伤肺组织以及活化NF-κ B p65并放大炎症的级联反应实现的;抗体阻断IL-17A能够明显减轻PQ中毒小鼠的ALI,同时有可能减轻中毒小鼠急性期的死亡。