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[目的]：本研究建立兔耳瘢痕模型,以磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3kinase, PI-3K)特异性抑制剂2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并毗喃-4酮(LY294002)进行干预,观察兔耳瘢痕形态学变化、瘢痕组织胶原含量及比例,AKT磷酸化表达,以及成纤维细胞凋亡,了解PI-3K/Akt信号转导通路在增生性瘢痕中的作用,探讨增生性瘢痕形成的分子机制,为临床探索瘢痕治疗的靶点提供实验依据。[方法]：全麻下建立兔耳瘢痕模型以及用LY294002进行干预,用随机数字法分为4组：A组实验组：浓度为100μmol/L的LY294002；B组空白对照组：未处理的瘢痕组；C组对照组：DMSO组；D阴性对照组：正常兔耳皮肤,A, B, C, D各5只兔子,共120个创面。术后连续外敷LY294002溶液或DMSO溶液21天,外敷剂量为每个创面面积0.5ml。在术后30天,60天,90天采集标本。采用光镜下观察苏木素-伊红染色、天狼猩红染色的组织结构变化情况；免疫组化法观察瘢痕组织和正常皮肤中磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K/Akt)下游底物Akt(Ser-473/Thr-308)两个位点磷酸化的表达情况,免疫荧光双染色法观察P-Akt (Ser473)及Thr-308蛋白活化同步活化状态,应用Western blot法对磷酸化Akt进行定性及半定量研究,及用TUNEL法观察细胞凋亡。[结果]：1、成功建立了兔耳增生性瘢痕模型,并鉴定其胶原的构成：正常组织Ⅰ型胶原约占(25.4±7.13)%,Ⅲ型胶原约占(74.58±7.14)%；瘢痕组织中,Ⅰ型胶原含量分别为(62.72±8.72)%；Ⅲ型胶原分别约为(35.26±6.80)%,具有差异显著(P<0.05)。2、经过对兔耳远、中、近端生成瘢痕进行评估,结果显示中、近端生成的瘢痕,发生率及增生厚度都更优于兔耳远端。3、LY294002组的瘢痕生长受到抑制,增生厚度与DMSO组及瘢痕组比较具有显著性差异(P<0.05)：4、免疫细胞化学染色结果表明,PI-3K/Akt下游底物P-Akt (Thr308)和P-Akt(Ser473)蛋白定主要位于细胞浆内,阳性表达率分析结果显示,与正常兔耳皮肤组织相比兔耳瘢痕中存在P-Akt (Thr308)(50%)和P-Akt (Ser473)(75%)的阳性高表达率,与DMSO组阳性表达率无差异(P>0.05)。而使用特异性抑制剂组与瘢痕组相比较组织中P-Akt (Thr308)和P-Akt (Ser473)的阳性表达率明显降低,统计学处理,差别具有显著性差异(P<0.01)。5、各组兔耳瘢痕组织中Akt, P-Akt (Thr308)及P-Akt (Ser473)蛋白的Western blot结果。GAPDH在各组瘢痕组织中表达基本一致,总AKT在B、C组中表达基本一致,A、D组表达略低于其余两组(P<0.01)。而P-Akt (S473)的表达A、D组表达弱于B、C组,P-Akt (Thr308)的表达水平较低,其表达趋势与总Akt及P-Akt (Ser473)呈正相关。6、免疫荧光双染色法可见P-Akt (Thr308)、P-Akt (Ser473)主要在胞浆内表达,并同时存在于瘢痕组织中,而LY294002组较瘢痕组呈现低表达。7、光镜下观察TUNEL凋亡染色结果,B组(DMSO组)与C组(正常皮肤组)中可见部分细胞存在散在凋亡(2.38±0.41)%。与B、C组相比A组(LY294002组)凋亡率上升(3.66±0.42)%,视野下可见大量细胞凋亡,差异具有显著性差异(P<0.01)。[结论1：1、在增生性瘢痕中,AKT、P-Akt (Thr308)及P-Akt (Ser473)蛋白呈高表达,其磷酸化位点P-Akt (Thr308)及P-Akt (Ser473)共活化,加入特异性抑制剂LY294002,其表达水平下调。2、在增生性瘢痕中,PI-3K/AKT信号转导通路活化后抑制成纤维细胞的凋亡,加入特异性抑制剂抑制其通路后,凋亡增加。3、P13K-Akt信号转导通路的激活抑制了成纤维细胞的凋亡；使该信号通路的激活水平上调,该信号转导通路可能是瘢痕形成的的机制之一。4、LY294002可能通过抑制iJPI-3K/Akt信号转导通路的表达而抑制细胞增殖,产生抑制瘢痕增生的作用。