包埋脱水法保存条斑紫菜自由丝状体的研究

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中文摘要:本文以条斑紫菜(Porphya yezoensis Ueda 03C、03D)自由丝状体为试验材料,用包埋脱水法进行保存。主要研究了包埋后超低温(-196℃)保存。在超低温保存中将丝状体包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,经硅胶砐湿法脱水后,探讨了脱水速率、胶球含水量及化冻温度对冰冻保存存活率的影响。结果表明: 1. 脱水速率对存活率的影响包埋后,分别以1%、5%、7.5%、10%、15%、20%的平均脱水速率(%含水量/h)进行脱水,结果两种株系都是在7.5%含水量/h 的较高的脱水速率下获得最高存活率。2. 含水量对存活率的影响以7.5%含水量/h的脱水速率脱水,胶球含水量对冰冻前的存活率影响不大,但对冰冻保存后的存活率影响很大。两种株系的最佳含水量都为25%,丝状体03C冰冻保存后存活率可达68.8%,丝状体03D 的存活率也可达到30.1%。3. 化冻温度的影响以丝状体03D 为研究对象,选用最佳脱水速率及最佳含水量点冰冻后,分别用0、20、30、40、50℃进行化冻。结果在30℃-50℃的较高化冻温度下,条斑紫菜丝状体03D的存活率显著高于0℃-20℃下的存活率。其中,30℃为最佳化冻温度,存活率可达到34.8%。   同时又初步探索了常低温保存。在包埋脱水法常低温保存中以丝状体03D 为试材,用包埋脱水法进行了常低温保存的研究。用相同方法包埋脱水后,密封放在20℃(光、暗)、4℃、-20℃条件下保存。结果为在4℃条件下较低的含水量的材料保存的时间最长且有很高的存活率。
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