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目的:肝纤维化作为慢性肝脏疾病的结局,其中心环节是肝细胞损伤引起的肝星状细胞(Hepatic Stellate Cells,HSCs)的激活。HSCs的激活可破坏肝脏细胞外基质(Extracellular Membrane,ECM)生成和降解之间的平衡,使ECM蛋白过多沉积于肝脏,从而引起肝纤维化,甚至肝硬化。天然植物药白杨素(Chrysin,CH)具有抗氧化、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等作用,但其对HSCs和肝纤维化的影响目前尚不清楚。因此,本研究旨在探讨CH对活化的人肝星状细胞珠LX-2的影响及其在四氯化碳(Carbon Tetrachloride,CCl4)导致的肝纤维化小鼠的肝损伤修复中的作用。方法:实验包括体外和体内两部分。体外实验:⑴CCK8实验确定CH的最佳作用时间和最佳作用浓度:(1)CH作用浓度:0、5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml及25μg/ml。(2)CH作用时间:24h、48h、72h、96h。(3)实验分组:助溶剂作用的对照组、CH作用组(浓度由CCK8实验确定)。⑵倒置显微镜观察两组LX-2细胞形态改变。⑶q RT-PCR实验检测反应HSCs活化状态的标记物(αSMA)、ECM产物(COL1、COL2、FN)及JAK/STAT信号通路抑制因子(SOCS1、SOCS3)在两组间的表达水平。⑷Western blot实验检测αSMA、ECM产物(COL1、COL2、FN、Agg)、Smad信号途径激活因子(TGFβ1、TGFβ2)和JAK/STAT信号通路抑制因子(SOCS1、SOCS3)在两组间的表达水平。体内实验:⑴昆明小鼠CCl4肝纤维化模型的建立:(1)实验分组:玉米油对照组、CCl4造模组。(2)给药途径及时间:腹腔注射;2次/周,共11次。(3)给药:对照组给予5ml/kg玉米油;造模组给予1ml/kg CCl4+4ml/kg玉米油混合物。⑵CH干预:(1)实验分组:阴性对照组(助溶剂干预的玉米油对照组)、CCl4进一步分三组,分别为助溶剂干预组、25mg/kg及50mg/kg CH治疗组。(2)给药途径及时间:灌胃,1次/d,共计15次。(3)评估各组炎症、坏死程度和纤维化程度:CH干预结束,取小鼠肝脏,固定、包埋、切片、HE染色,显微镜下观察,评估其炎症、坏死和纤维化程度。结果:⑴CH对LX-2细胞的半数抑制浓度IC50分别为:48h:25.60μg/ml(95%CI:21.35-30.64μg/ml);72h:22.25μg/ml(95%CI:20.37-24.31μg/ml);96h:18.96μg/ml(95%CI:17.91-20.07μg/ml)。⑵与对照组相比,经25μg/ml CH作用48h后,LX-2细胞增殖活性降低,细胞由肥胖的肌成纤维细胞样变为纤细的纤维细胞样,由活化细胞形态进入静止期细胞形态。⑶在m RNA水平上,与对照组相比,CH作用组αSMA及COL1表达水平降低,COL2表达水平升高,且差异具有统计学意义(p<0.05),FN表达水平升高,但差异不具有统计学意义(p>0.05);SOCS1表达水平明显升高,且差异具有显著统计学意义(p<0.01),SOCS3表达水平升高,但差异不具有统计学意义(p>0.05)。⑷在蛋白水平上,与对照组相比,CH作用组αSMA、COL1、COL2、FN、Agg、TGFβ1及TGFβ2蛋白表达水平降低,而SOCS1及SOCS3蛋白表达水平升高。⑸昆明小鼠经1mg/kg CCl4造模,2次/周,连续5周半,纤维化造模可以成功。⑹不同方式处理后,4组肝脏标本在炎症、坏死程度(G)和纤维化程度(S)上均有差别,且差异具有显著统计学意义(p<0.05)。结论:⑴CH能抑制LX-2细胞的增殖活性,并使其由活化的肌成纤维细胞样形态转变为静止的纤维细胞样形态。⑵CH可能通过促进SOCS1基因表达,并抑制细胞因子TGFβ1的表达,减轻炎症反应,使活化的LX-2细胞向静止期转化,使ECM蛋白生成减少。⑶CH能减轻小鼠肝纤维化程度。