肌红蛋白（Mb）具有分子量小（约17 k Da）、易制备等优点,常被作为蛋白模型来研究和阐明蛋白结构和功能的关系。同时,通过基因工程的方式可改变Mb活性部位的空间构筑,并赋予Mb新颖的催化性能。为了进一步提升Mb的稳定性和经济性,本文以SBA-15介孔材料为载体对其进行了固定化,制备了固定化酶,研究了SBA-15介孔材料孔径变化、固定化方式对酶固定化性能的影响,测试了固定化酶的催化活性、稳定性及其重复利用性能。具体如下:（1）用大肠杆菌E.coil BL21（DE3）将Mb质粒转化,进行表达和扩大培养,成功获得了肌红蛋白菌体。综合利用硫酸铵沉淀、透析、离子层析、分子排阻色谱等技术,建立了Mb的纯化技术路线,使用SDS-PAGE电泳测试蛋白的纯度,结果表明最终纯化获得了电泳纯的蛋白,其分子量约17 k Da。（2）利用水热合成法制备了孔径分别为5.5 nm、7.2 nm和9.8 nm的SBA-15材料。采用物理吸附法开展SBA-15对Mb固定化性能研究,考察了孔径大小对SBA-15固定化Mb的吸附速率、固载量、重复使用性以及固定化蛋白活性的影响。孔径为9.8 nm的SBA-15具有更快的吸附速率和酶活,蛋白最大负载量为359.6 mg/g,酶活保留为93.24%。选用孔径为9.8nm的SBA-15对固定化蛋白的稳定性进行了研究。结果表明,固定化Mb相较游离蛋白具有更好的温度、有机溶剂、金属离子和储存稳定性。同时,研究发现在吸附体系中添加交联剂戊二醛能够有效提高固定化蛋白的负载量和重复使用性能,负载量达到471.3 mg/g,比物理吸附提高了31.06%。在重复使用7次后,物理吸附保留了36.41%的初始活性,加入戊二醛后保留了62.37%的初始活性。（3）在前期研究基础上,使用3-氨基丙基三乙氧基硅烷（APTES）和3-缩水甘油基氧丙基三甲氧基硅烷（GPTMS）为功能化试剂,使用后嫁接法合成了表面含有氨基和环氧基的介孔分子筛SBA-15-A和SBA-15-G,并用于Mb的共价固定化研究。结果表明,载体改性后,其蛋白的负载量、固定化酶的热稳定性能和重复使用性能均得到了有效的提高。SBA-15-A和SBA-15-G的蛋白负载量分别达到了511.2 mg/g和547.8 mg/g,相较未改性SBA-15分别提高了42%和52.3%,固定化蛋白重复使用七次后分别保留了82.7%和84.6%的初始活性,分别比未改性提高了46.29%和48.19%。