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本研究利用碳化二亚胺(EDC)法分别合成了诺氟沙星(NFLX)与载体蛋白BSA(牛血清白蛋白)和HSA(人血清白蛋白)的连接物，制备了两种人工抗原，并免疫小鼠，获得针对诺氟沙星的抗体。用紫外分光光度法进行了鉴定，并计算连接比率，结果分别是60：1(NFLX-BSA)和60：1(NFLX-HSA)。间接ELISA检测结果显示，NFLX-BSA、NFLX-HAS两种连接物在三免后抗体效价均达到1：6400以上。 成功建立了检测抗诺氟沙星抗体的间接ELISA方法，其主要条件如下：pH9.6、0.005mol／L的碳酸盐缓冲溶液(CBS)为包被液，1μg／mL的连接抗原NFLX-BSA(诺氟沙星-牛血清白蛋白)为包被抗原，1％明胶为封闭液，1：1000稀释的HRP酶标记的羊抗小鼠抗体作为二抗，TMB(3，3，5，5-四甲基联苯胺)作为底物。试验证明本法特异性强，有较好的重复性。用该法对NFLX免疫小鼠的血清抗体及其杂交瘤细胞单抗上清进行检测，获得满意的效果。 通过细胞融合，获得一株能稳定分泌抗NFLX特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为3C2。其细胞培养上清效价达1：51200，腹水效价为1：1638400。该单抗与其他抗生素的交叉反应率均低于0.01％。该杂交瘤细胞株连续传代25代，6个月内冻存、复苏3次，仍能稳定分泌抗诺氟沙星的单抗。 利用3C2杂交瘤细胞株的小鼠腹水单抗建立了检测NFLX残留的竞争ELISA方法。其关键步骤的最佳试验条件为：最佳包被抗原浓度为1μg／mL，腹水的最佳稀释比例是1：1×10~5。最适检测范围为10μg／mL-10ng／mL，检测限量为10ng／mL，得到的回归方程是y=0.3091-0.2246x，R~2=0.8759。该方法有待进一步研究、改进，并结合金标免疫层析做成试纸条，以用于生产实践中诺氟沙星残留的快速检测。