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接种卡介苗是当今各国预防结核病最有效的手段之一。分支杆菌属的成员如草分支杆菌、母牛分支杆菌等也被广泛的应用于疫苗和佐剂的制备。但是,由于是全菌制剂,菌体中对免疫功能无作用、甚至起抑制作用的成分同时存在在疫苗中,卡介苗使结核菌素的皮试出现阳性反应,因而限制了它们的应用。 本文从结核分支杆菌中提取菌体蛋白和多肽,通过生物化学的方法对其进行定量检测。经过动物试验,探讨分支杆菌菌体蛋白和多肽对鸡特异性免疫和非特异性免疫的效应,最终筛选出一种低毒、高效的新型免疫增强剂并确定了临床最佳用药剂量。 利用超声波低温破碎技术,提取、制备结核分支杆菌中的菌体蛋白和多肽,应用生物化学方法(lowry法)测定菌体蛋白和多肽的含量;Tricine-SDS-PAGE电泳分析菌体蛋白组分。试验结果表明:不同批次提取的菌体蛋白含量相对稳定,没有明显差异;组分分析结果表明,菌体蛋白由多种组分构成,分子量由66kD到6.5kD不等。 按人常用剂量,根据人/鸡体表面积比,计算鸡用药量。利用所提取的结核分支杆菌菌体蛋白和多肽投服试验鸡。210只鸡被均分为分支杆菌菌体蛋白高剂量组(0.9mg/只)、分支杆菌菌体蛋白中剂量组(0.45mg/只)、分支杆菌菌体蛋白低剂量组(0.225mg/只)、透析多肽组(0.3mg/只)、未破碎全菌体组(0.3g/只)、分支杆菌菌体蛋白注射组(0.45mg/只)和对照组(生理盐水)七个组。除注射组外,其余六组均采用口服给药。各组试验鸡于给药后7d、14d、21d、28d分四次扑杀,分别检测鸡外周血淋巴细胞转化率、鸡新城疫抗体滴度、红细胞免疫水平、外周血淋巴细胞CD3+亚群和淋巴器官的组织发育情况。试验结果表明,分支杆菌菌体蛋白投服试验组均能提高鸡体的特异性免疫和非特异性免疫功能,尤以菌体蛋白注射组和菌体蛋白中剂量口服组诱导机体免疫效果为好。