本研究分为三部分：　　 第一部分:UrotensinⅡ及其受体GPR14在非小细胞肺癌A549细胞中的表达　　 目的：研究UrotensinⅡ(UⅡ)及其受体GPR14在非小细胞肺癌A549细胞中的表达情况。　　 方法：　　 1.肺癌A549细胞的培养:体外常规培养。　　 2.RT-PCR法检测UⅡ及其受体GPR14 mRNA在肺癌A549细胞中的表达。　　 3.免疫细胞化学技术检测UⅡ肽及其受体GPR14分子在肺癌A549细胞中的表达。　　 4.Western blot法检测UⅡ肽及其受体GPR14分子在肺癌A549细胞中的表达。　　 5.ELISA检测UⅡ肽在肺癌A549细胞裂解液及培养基上清液中的含量。　　 结果：　　 1.体外培养的肺癌A549细胞生长良好,可以用于以下实验。　　 2.凝胶电泳显示,在肺癌A549细胞中,UⅡ及其受体GPR14 mRNA有表达。　　 3.免疫细胞化学显示,在肺癌A549细胞中,UⅡ肽主要表达在细胞浆中,UⅡ受体GPR14分子主要表达在细胞膜上。　　 4.Western blot显示,在肺癌A549细胞中,UⅡ肽及其受体GPR14分子均有表达。　　 5.ELISA检测显示,UⅡ肽在肺癌A549细胞裂解液中的含量约为125.58ng(约5.6×106个细胞),培养基上清液中未检出UⅡ。　　 结论：　　 在本实验条件下得出以下结论:　　 无论从基因水平还是蛋白质水平,UⅡ及其受体在非小细胞肺癌A549细胞中均有　　 表达。　　 第二部分:UrotensinⅡ对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响　　 目的：研究UⅡ对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。　　 方法：　　 1.肺癌A549细胞分别用10-9、10-8、10-7、10-6M的UⅡ进行处理,以生理盐水处理作为对照,通过MTT方法检测肺癌A549细胞的增殖活性。　　 2.肺癌A549细胞分为对照组、UⅡ组、顺铂组、顺铂+UⅡ组,体外常规培养,TUNEL法检测UⅡ对肺癌A549细胞凋亡的影响。　　 结果：　　 1.各实验组细胞处理48小时后,与对照组相比,10-9、10-8、10-7、10-6M UⅡ组细胞增殖能力显著提高(P＜0.01),10-7M UⅡ对肺癌A549细胞的增殖能力最强。　　 2.各实验组细胞处理48小时后,与对照组比较,UⅡ组肺癌A549细胞的凋亡率显著降低(P＜0.01);与对照组比较,顺铂组肺癌A549细胞的凋亡率显著增加(P＜0.01);与顺铂组相比,顺铂+UⅡ组肺癌A549细胞的凋亡率显著降低(P＜0.01)。　　 结论：　　 在本实验条件下得出以下结论:体外实验表明,UⅡ能明显促进非小细胞肺癌A549细胞的增殖,抑制肺癌A549细胞的凋亡,UⅡ能够降低顺铂促进肺癌A549细胞凋亡的能力。　　 第三部分:UrotensinⅡ对非小细胞肺癌A549细胞在裸鼠体内成瘤后肿瘤生长的影响　　 目的：观察UⅡ对非小细胞肺癌A549细胞在裸鼠体内成瘤后肿瘤生长的影响。　　 方法：　　 1.将非小细胞肺癌A549细胞接种于裸鼠皮下建立移植瘤模型,待移植瘤平均直径达到4mm后随机分为四组:对照组、UⅡ组(401μg/kg)、顺铂组(25mg/kg)、顺铂+UⅡ组(顺铂,25mg/kg和UⅡ,40μg/kg),每周给予相应的药物两次。每周测量移植瘤体积,连续给药7周。　　 2.绘制各组裸鼠移植瘤生长曲线。　　 3.称量各组裸鼠移植瘤的重量。　　 结果：　　 1.所有接种肺癌细胞系A549的裸鼠均成瘤。　　 2.与对照组相比,UⅡ组裸鼠移植瘤生长曲线更加陡直;与对照组相比,顺铂组裸鼠移植瘤生长曲线平缓;与顺铂组相比,顺铂+UⅡ组裸鼠移植瘤生长曲线较陡直。　　 3.与对照组相比,UⅡ组裸鼠移植瘤重量显著增大(P＜0.05):与对照组相比,顺铂组裸鼠移植瘤重量显著减小(P＜0.01);与顺铂组相比,顺铂+UⅡ组裸鼠移植瘤重量比顺铂组移植瘤大,但两组移植瘤重量差别无统计学意义(P＞0.05)。　　 结论：　　 在本实验条件下得出以下结论:在体实验表明,UⅡ能明显促进非小细胞肺癌A549细胞在裸鼠体内成瘤后移植瘤的生长。