【摘 要】
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桑葚（Morus alba L.）是荨麻目桑科植物桑树的果实,属食药同源水果,其营养丰富,富含花色苷、多糖、多酚、维生素、有机酸、矿物质等营养成分,可以作为辅助降血糖、降血脂的食材。目前,除了少量鲜食外,已有部分加工成果酒、果醋、果酱、果汁、果干等产品。本文以桑葚为原料,首先,优化了桑葚花色苷的超高压辅助提取工艺条件和纯化工艺,并对比分析了超高压辅助提取与溶剂法提取对桑葚花色苷单体组成成分的影响;
【基金项目】
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江苏省自然科学基金（BK20191242）; 南京市产学研合作示范基地项目
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桑葚（Morus alba L.）是荨麻目桑科植物桑树的果实,属食药同源水果,其营养丰富,富含花色苷、多糖、多酚、维生素、有机酸、矿物质等营养成分,可以作为辅助降血糖、降血脂的食材。目前,除了少量鲜食外,已有部分加工成果酒、果醋、果酱、果汁、果干等产品。本文以桑葚为原料,首先,优化了桑葚花色苷的超高压辅助提取工艺条件和纯化工艺,并对比分析了超高压辅助提取与溶剂法提取对桑葚花色苷单体组成成分的影响;其次,还检测了桑葚花色苷的体外抗氧化活性及其抑菌能力;最后,以桑葚花色苷对α-淀粉酶与α-葡萄糖苷酶的抑制率为指标,评价了桑葚花色苷的体外降血糖活性。主要研究内容与结果如下:（1）通过单因素试验和响应面分析,建立了桑葚花色苷得率的预测模型,确定超高压辅助提取桑葚花色苷的最佳工艺条件为:乙醇浓度75%、提取压力430 MPa、液料比12:1 m L/g,各因素对花色苷得率的影响从大到小依次为提取压力＞乙醇浓度＞液料比,在此条件下花色苷得率为1.97 mg/g。（2）通过比较5种不同树脂对桑葚粗提物花色苷的吸附与解吸效果,确定AB-8树脂为花色苷最佳纯化树脂。当花色苷浓度为1.0 mg/m L,p H值为3.0,上样流速1.0m L/min时,AB-8树脂对桑葚花色苷的吸附量最大;使用80%的酸性乙醇溶液,以1.0m L/min流速进行洗脱,当洗脱液体积为110 m L时,解吸效果最好,有利于纯化物的收集。经过树脂纯化后:花色苷含量提高13.1倍,色价提高12.12倍,除糖率与除蛋白率分别为44.71%、61.16%。（3）利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱技术（UPLC-QTof-MS）,以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为标准品对桑葚花色苷进行定量测定,对比分析超高压辅助提取（UHP）与溶剂法提取（SE）得到的桑葚花色苷单体组成成分发现,UHP提取得到的桑葚花色苷单体组成为:矢车菊素-3-O-葡萄糖苷（47.07%）、矢车菊素-3-O-芸香糖苷（39.69%）、天竺葵-3-O-葡萄糖苷（2.14%）、飞燕草素-3-O-芸香糖苷（2.13%）、矮牵牛素-3-O-（6-O-香豆酰化）-葡萄糖苷（2.06%）、锦葵素-3-O-（6-O-香豆酰化）-葡萄糖苷（6.91%）;SE提取得到的桑葚花色苷单体组成为:矢车菊素-3-O-葡萄糖苷（54.52%）、矢车菊素-3-O-芸香糖苷（35.66%）、天竺葵-3-O-葡萄糖苷（2.07%）、飞燕草素-3-O-芸香糖苷（4.85%）、锦葵素-3-O-（6-O-香豆酰化）-葡萄糖苷（2.90%）。对比得出,两种不同提取方法得到的桑葚花色苷中占大多数的矢车菊色素（矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-芸香糖苷）含量差异较小,其他花色苷单体的组分略有变化。（4）桑葚花色苷体外抗氧化检测结果显示:桑葚花色苷对DPPH自由基、羟自由基有较强的清除能力,二者的半抑制浓度IC50为0.026、0.406 mg/m L,分别是VC的0.47倍、1.18倍,对铁离子的还原能力也较强;通过平板计数法检测花色苷对不同致病菌的抑菌效果,发现抑菌能力大小依次为:沙门氏菌＞单增李斯特菌＞金黄色葡萄球菌＞大肠杆菌＞铜绿假单胞菌。（5）桑葚花色苷体外降血糖活性研究结果表明:花色苷对α-淀粉酶与α-葡萄糖苷酶有较强的抑制活性,在一定浓度范围内,随着桑葚花色苷浓度的增大其抑制率也增加,半抑制浓度IC50分别为0.1489、0.1628 mg/m L;桑葚花色苷对α-葡萄糖苷酶的抑制类型为混合型抑制,但以非竞争性抑制为主,说明桑葚花色苷具有较强的降血糖活性,有望成为新一代α-葡萄糖苷酶抑制剂。环境条件对花色苷抑制α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶活性试验结果表明,温度、p H及光照均会对桑葚花色苷的α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制活性产生较大影响,在贮存与应用过程中,应注意在低温、避光、低酸条件下进行,避免花色苷的降解,影响其生物活性。
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