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丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)是我国最广泛使用的传统中草药药材之一。它具有促进血液循环,缓解气虚的作用,可以用来生产制剂治疗心脑血管疾病。丹参酮除了具有活血化淤平静神经、祛瘀止痛、养心安神传统功效外,近年来对其抗氧化、抗菌、抗炎、治疗心脑血管疾病、抗肿瘤等药理作用的研究日趋深入,使其拥有非常广阔的应用前景。目前,关于丹参中脂溶性成分丹参酮类的分离制备方法已有很多科学报道,但分离制备方法不同导致丹参酮物质的质量和纯度良莠不齐,本研究优化丹参及相关产业化过程中具有重要意义的丹参酮类物质(丹参新酮和二氢丹参酮Ⅰ)的标准样品制备工艺、以丹参新酮和二氢丹参酮Ⅰ为对象,研制具有可溯源和量值传递功能的国家级计量有证标准样品,并建立有效定值分析方法。主要研究内容如下:1、二氢丹参酮Ⅰ和丹参新酮标准样品的制备采用柱层析法对道地药材丹参根进行提取纯化,以市售二氢丹参酮Ⅰ、丹参新酮标准样品为参照,分别研制了二氢丹参酮Ⅰ、丹参新酮纯度标准样品各1g。优化制备工艺如下:回流提取次数3次,乙醇体积:5至7倍,乙醇浓度95%,结晶温度:2至5℃,丹参新酮洗脱液:石油醚-苯,二氢丹参酮Ⅰ洗脱液:石油醚-二氯甲烷。2、二氢丹参酮Ⅰ和丹参新酮标准样品纯度确定和结构确证采用HPLC-DAD测定经以上得到的二氢丹参酮Ⅰ和丹参新酮标准样品,纯度达到99%以上。四种主要的波谱(NMR核磁共振,LC-MS液质联用,IR红外光谱,UV紫外光谱)来鉴定结构,确认所得到的样品是丹参新酮和二氢丹参酮Ⅰ。3、二氢丹参酮Ⅰ和丹参新酮标准样品均匀性、稳定性检验对制备的丹参新酮和二氢丹参酮Ⅰ标准样品,分装储存后,以色谱级乙腈作为溶剂,配制成250 μg/mL浓度的溶液进行均匀性、稳定性检验,使用高效液相色谱峰面积归一化法测定其纯度,分别使用单因素方差分析法(F检验)和趋势分析(T检验)进行统计计算,结果表明丹参新酮和二氢丹参酮Ⅰ标准样品制备趋势稳定,分布均匀,数据稳定,溶液稳定性、长期稳定性良好。二氢丹参酮Ⅰ标准样品均匀性检验的不确定度为0.013128,扩展不确定度0.104;丹参新酮标准样品的均匀性检验不确定度为0.0235,扩展不确定度为 0.1344。4、二氢丹参酮Ⅰ和丹参新酮标准样品定值按照GB/T15000.3-2008标准要求,送测8家有资质的单位实验室协同对二氢丹参酮Ⅰ和丹参新酮标准样品进行定值实验,经过统计计算,得到二氢丹参酮Ⅰ和丹参新酮样品的标准值及不确定度。最终结果为:丹参新酮标准样品的标准值为99.35%,不确定度为0.3347%,二氢丹参酮Ⅰ标准样品的标准值为99.71%,不确定度为0.26%。