单增李斯特菌为革兰氏阳性杆菌，是重要食源性人兽共患病病原微生物，该菌可引起人和多种动物的李斯特菌病。世界卫生组织已将其列为20世纪90年代四大食源性致病微生物之一。近年来世界范围内李斯特菌的发生有不断上升趋势，在食品中的污染广泛存在。目前，检测食品中单增李斯特菌传统方法的操作繁琐，检测周期长，通常需要4⁷天，不能满足食品中单增李斯特菌快速检测的需要。因此需要建立一种快速、方便的单增李斯特菌的检测方法。2000年，Notomi T.等人研究开发出一种新的核酸扩增技术——环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal amplification，简称LAMP）。该技术具有高特异性、高灵敏度、简便快速和成本低的特点，已在病毒、细菌以及转基因食品的检测中得到应用。本研究以单增李斯特菌的hlyA基因作为靶基因，设计特异性引物，利用实时浊度监测仪65℃保温反应60min。特异性实验结果表明：LAMP法的特异性良好，能区分单增李斯特菌和其它食品中常见的细菌。灵敏度实验结果表明：检测该菌基因组DNA的灵敏度达92fg/反应管，检测该菌纯培养物的灵敏度达13CFU/反应管，检测人工污染样品的灵敏度达13CFU/反应管，均比PCR法高出10倍；结合3h的前增菌，LAMP法能检测出样品中极低浓度的单增李斯特菌。检测实际肉类样品的实验表明：与GB4789.30－2010培养方法比较，LAMP方法的符合率为96.67%，结合前增菌的LAMP方法的符合率为100%。Calcein－Mn²⁺作为一种新型指示剂，可以直接加到反应液中，对LAMP扩增反应的影响较少，最后显色得出实验结果与浊度仪指示结果一致。Calcein－Mn2+新型指示剂的开发和应用，简化了实验操作流程，降低了实验污染的概率。本次研究所建立的LAMP方法能够直接对食品样品中的单增李斯特菌进行检测，大约1h即可完成，与传统培养方法相比，大大缩短了检测周期，为食品安全争取了更为广泛的时间范围。