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本厂研究目的:
研究变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的大鼠动物模型在不同阶段血液中单核细胞中转录因子T-bet和GATA-3表达的动态变化及其表达对Th1和TH2细胞因子的影响,以探索T-bet和GATA-3表达在AR发生发展中的作用。通过用大蒜新素对AR的大鼠动物模型进行干预,探索大蒜新素对T-bet和GATA-3表达的影响,寻求治疗的新途径。
研究方法:
20只SD大鼠随机分成对照组和实验组,每组10只,雌雄不限。实验组大鼠用鸡卵蛋白致敏激发成AR动物模型,对照组用生理盐水。在动物模型的制备过程中,分别在致敏结束,首次激发后10小时和末次激发后10小时各采集心脏血液标本2ml,EDTA抗凝处理。用淋巴细胞分离液分离出血浆和单核细胞。用ELISA法检测血浆中IL-4和IFN-γ的表达水平,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分析单核细胞中r-bet和GATA-3表达,计算二者的相对表达量。研究T-bet和GATA-3的表达与血浆中IL-4和IFN-γ的表达之间的关系。 30只SD大鼠随机等分成药物组,对照组和空白组。药物组和对照组用OVA致敏激发建立成AR动物模型,对照组用生理盐水。药物组在AR动物模型建成后用大蒜新素对AR大鼠模型行腹腔注射,对照组和空白组腹腔注射生理盐水,鼻部激发同前,共10天。末次注射后24小时,采集心脏血液标本2ml,分离血浆和单核细胞,用上述方法检测血浆中IL-4和IFN-γ的表达水平和单个核细胞中T-bet和GATA-3的表达,研究大蒜新素对T-bet和GATA-3表达的影响。
结论:1.变应性鼻炎模型中血液单核细胞中GATA-3的表达逐渐增强,其表达上调。而T-bet在激发早期表达上调、增强,激发末期表达下调、减弱。变应性鼻炎的发生发展是连续的,程序化的动态的过程,GATA-3和T-bet表达失衡在AR发生发展中起着重要作用。Th1和Th2细胞均参与了变应性鼻炎过程,只是在气道炎症发展的不同时期,T淋巴细胞分泌IFN-γ及IL-4的能力不同。
2. T-bet/GATA-3表达的比值与血浆中IFN-γ和IL-4浓度无相关关系,说明变应性鼻炎除Th1和Th2细胞参与炎症反应外,其它炎症细胞可能也参与炎症反应。T-bet/GATA-3表达的比值比Th1/Th2细胞因子的比值更能准确的反应变应性鼻炎免疫失衡的状态。
3.大蒜新素的作用机制可能是通过上调转录因子T-bet的表达水平,促进Thl类细胞因子IFN-γ的分泌:并下调转录因子GATA-3表达水平,抑制Th2类细胞因子IL-4的表达,主要是增强T-bet的表达,纠正并恢复Th1/Th2细胞免疫平衡。大蒜新素能一定程度改善变应性鼻炎大鼠模型的临床症状,为从细胞因子上游的转录水平进行治疗变应性鼻炎提供理论依据,为变应性鼻炎提供了新的治疗途径。