乳牛分娩7d内乳汁称为牛初乳,作为一种功能性食品,其富含免疫因子及生长因子等生理功能性物质和多种营养物质都远远高于常乳,其中免疫球蛋白(IgG)是最重要的免疫成分,是由于IgG具有抗体活性且与抗体结构相似,能与抗原发生特异性结合,能够显著增加T淋巴细胞的增殖活性、巨噬细胞的吞噬能力,从而减少病原对机体伤害,提高机体的免疫力,故IgG含量成为衡量牛初乳的重要指标之一。本研究首先复苏小鼠抗牛免疫球蛋白IgG杂交瘤细胞,然后采用小鼠体内诱生法进行大量制备,对采集的腹水首先选用辛酸—硫酸铵法粗提纯,然后再进行亲和层析法纯化。经测定,所分泌的单克隆抗体亚类为IgG1,浓度为46.85 mg/mL,效价为5.12×106；经辛酸-硫酸铵法纯化后浓度为10.88 mg/mL,效价为2.56×106；进一步经亲和层析纯化法纯度较高,浓度为2.21 mg/mL,效价为2.56×106,亲和力常数为8.92×108,属高亲和力抗体。用纯化后的单克隆抗体建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)来检测牛IgG,该方法的线性回归方程为y=0.4703 lgx一0.1582(R2=0.9926),最低检测限为7.06ng/mL,批内变异系数为4.52%，批间变异系数为4.94%，加标回收率平均值为95.87%,精密度、准确度、稳定性较好。采用此方法分别检测10份牛初乳样品,IgG含量在为50.29-79.68 mg/mL,平均值为65.40 mg/mL.磁珠双抗夹心ELISA法的线性回归方程为y=0.3822 lgx-0.0648(R2=0.9736),最低检测限能达到7.67 ng/mL,批内变异系数为8.89%,批间内变异系数为9.81%,加标回收率平均值为103.66%。采用此方法分别检测10份牛初乳样品,IgG含量在为58.64-82.66 mg/mL,平均值为69.66 mg/mL。磁珠双抗夹心ELISA法检测更快速,但准确度比双抗夹心ELISA法低,适合快速检测,而双抗体夹心ELISA法适用于精确检测。