附睾是家畜重要的生殖器官,具有储存、转运及促进精子成熟的功能,但不同部位其功能具有明显的差异。本研究探讨了绵羊附睾不同部位上皮细胞的生物学特性及相关基因表达情况,为进一步研究绵羊附睾功能的调节机制奠定基础。研究主要结果如下:1.附睾上皮细胞分离、培养及其生长特性。以酶消化法进行绵羊附睾头部、体部和尾部上皮细胞的分离。培养条件为RPMI1640培养基添加10%胎牛血清、5μg/m L转铁蛋白、100nmol/L雄激素、50U/m L青霉素和50μg/m L链霉素,37℃,5%CO2。细胞生长曲线结果表明:在培养第2～4天时,附睾头部上皮细胞增殖率极显著高于体部和尾部（P<0.01）;在第5天时,头部和体部上皮细胞增殖率极显著高于尾部（P<0.01）。细胞周期检测结果表明:原代分离的附睾上皮细胞中,处于S期+G2期的附睾头部、体部和尾部上皮细胞数分别为49.23%和51.79%,极显著高于尾部的（42.78%,P<0.01）,头部和体部之间差异不显著。P2代细胞凋亡测定结果表明:附睾头部和体部上皮细胞活细胞率分别为88.23%和88.30%,极显著高于尾部（78.89%,P<0.01）,而头部和体部之间差异不显著。2.附睾上皮细胞相关功能基因（P66shc、P34H、Serpina1、AK1、Clu）的表达特征。实时荧光定量PCR结果表明:P66shc、P34H、Serpina1基因从附睾头到附睾尾呈现明显下降趋势,其中头部极显著高于体部（P<0.01）,体部极显著高于尾部（P<0.01）;AK1在头部表达显著高于体部（P<0.05）;Clu在头部和体部上皮细胞的表达极显著高于尾部（P<0.01）,但头部和体部之间表达差异不显著。3.附睾上皮细胞抗氧化酶基因（GPXs、PRDXs）表达特征。实时荧光定量PCR结果表明:Gpx1、Gpx4在附睾头、体、尾上皮细胞中表达无显著差异;Gpx2和Gpx3在体部和尾部均极显著高于头部（P<0.01）,但是体部与尾部差异不显著（P>0.05）,表现为头部低于体部;Gpx5在头部极显著高于体部和尾部（P<0.01）,同样发现体部和尾部之间无显著差异。Prdx1和Prdx4在附睾头、体、尾部上皮细胞之间表达差异不显著。Prdx2在和Prdx3头部和体部均极显著高于尾部（P<0.01）,头部和体部差异不显著（P>0.05）。Prdx5在头部极显著高于体部和尾部（P<0.01）,体部和尾部之间差异不显著。结果表明绵羊附睾不同部位的抗氧化酶基因表达存在明显差异。总之,绵羊附睾不同部位上皮细胞在生物学特性及相关基因表达上存在明显差异,这种差异性可能与绵羊附睾不同部位的功能密切相关。