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目的:二氢槲皮素(Taxifolin,TAX)是存在于花旗松等松科植物中的黄酮类化合物,具有抗炎,抗氧化等药理作用。本实验通过建立体内,体外急性痛风模型,探究TAX对尿酸钠晶体(Monosodium urate crystals,MSU crystals)诱导的急性痛风的治疗作用。方法:在体内实验中,(a)MSU晶体诱导的小鼠气囊模型中,雄性昆明小鼠随机分为五组(n=5):正常组、MSU模型组(3 mg/m L)、MSU+TAX(100mg/kg)组、MSU+TAX(200 mg/kg)组、MSU+秋水仙碱阳性对照组(3mg/kg)。小鼠的背部皮肤,利用H&E染色以及免疫组化染色观察背部皮肤组织的病理学变化;并利用蛋白印迹实验和组织免疫荧光染色,进一步分析皮肤组织中IL-1β、HMGB1、caspase-1等相关炎性因子的表达水平的变化。(b)MSU晶体诱导的急性痛风模型中,将小鼠随机分成以下七组(n=5):即正常组、MSU模型组(4 mg/0.1 m L)、MSU+TAX(50 mg/kg)组、MSU+TAX(100mg/kg)组、MSU+TAX(200 mg/kg)组、TAX(200 mg/kg)单独给药组、MSU+秋水仙碱阳性对照组(3 mg/kg)。(c)小鼠高尿酸血症模型,将小鼠随机分为以下六组(n=5),即正常组、高尿酸血症模型组(OXO300 mg/kg+YE20g/kg)、TAX给药组(100 mg/kg、200 mg/kg),TAX(200 mg/kg)单独给药组和别嘌呤醇(AL7 mg/kg)阳性对照组。在体外实验中,给予0-200μM的TAX孵育24 h,通过MTT法检测TAX对小鼠腹腔巨噬细胞(Murine peritoneal macrophage,MPM)活性的影响;给予不同浓度的TAX(50、100、200μM)预处理,1 h后给予脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激。4 h后,尿酸钠晶体(500μg/m L)继续孵育18 h。提取细胞总蛋白,并收集细胞上清液,通过蛋白印迹实验,ELISA实验检测MPM中IL-1β、HMGB1和Caspase-1等相关炎症因子的表达。结果:在体内实验中,通过H&E染色,免疫荧光和免疫组化染色观察,TAX可减轻小鼠足掌,背部皮肤和肾脏的病理学变化,改善小鼠足掌肿胀。同时TAX还可以降低IL-1β、HMGB1、NE、caspase-1的表达,提高LC3的表达的水平,说明TAX可以降低痛风样炎症反应并诱导自噬的发生。在体外实验中,MTT结果表明,0-200μM的TAX对MPM细胞存活率无明显影响。LPS/MSU刺激MPM,诱导炎症反应的发生,然而二氢槲皮素和秋水仙碱预处理可显著降低IL-1β、Caspase-1、HMGB1和Cathepsin B等相关炎性因子的表达,同时降低Beclin-1和SQSTM1的表达,提高LC3的表达,促进巨噬细胞的自噬和吞噬能力。结论:该研究表明,二氢槲皮素通过减少炎症细胞因子的产生和促进自噬来减轻MSU诱导的小鼠急性痛风模型中的炎症反应。膳食补充二氢槲皮素可诱导自噬并减弱炎症反应,从而调节急性痛风。将饮食干预与二氢槲皮素相结合的预防策略可能为药物治疗提供潜在的选择,以减少痛风的发生。