瘦素对人冠状动脉内皮细胞CRP和PAI-1表达的影响

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目的:观察瘦素(Leptin, LP)对人冠脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells, HCAECs)C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(Plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)表达的影响,探讨LP与冠脉血栓形成间的关系。方法:在实验中使用克隆的人冠脉内皮细胞(HCAECs),取3-5代细胞,当细胞生长至70%-80%融合时,将细胞分为六组,每组各六个复孔,工具对照组为无内皮细胞生长因子(endothelial cell growth factor, ECGF) DMEM,其余五组HCEACs分别与不同浓度的瘦素(Ong/ml、20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml)作用48小时,收集条件培养基通过酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定CRP和PAI-1的浓度。蛋白免疫印迹法(Western Blot, WB)检测细胞内CRP和PAI-1的蛋白表达量。结果:(1)比较六组细胞培养基中CRP水平,50-200ng/ml的瘦素处理组均高于正常对照组,其诱导效应随瘦素浓度增加而增强,差异有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000,<0.05);(2)比较六组细胞培养基中PAI-1水平,50-200ng/m1的瘦素处理组均高于正常对照组,其诱导效应随瘦素浓度增加而增强,差异有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000,<0.05);(3)比较六组细胞内CRP相对表达量,50-200ng/ml的瘦素处理组均高于正常对照组,其诱导效应随瘦素浓度增加而增强,差异有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000,<0.05);(4)比较六组细胞内PAI-1相对表达量,50-200ng/ml的瘦素处理组均高于正常对照组,其诱导效应随瘦素浓度增加而增强,差异有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000,<0.05)。结论:瘦素能够呈剂量依赖性地增加人冠脉内皮细胞的CRP和PAI-1蛋白的表达。表明瘦素具有促炎和促栓的作用。这是其作为一种独立心血管危险因素的重要原因,提示瘦素作为潜在的药物靶点可以用于干预心血管疾病。图7幅,表4个,参考文献44篇。
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