【摘 要】
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细粒棘球蚴病（Echinococcosis）又称包虫病,为一种呈世界性分布的人畜共患寄生虫病。我国是包虫病主要流行的国家之一,其主要流行于西北部的农牧地区。介于该病带来的严重经济损失,对于包虫病的诊断是细粒棘球蚴病综合防控的关键步骤之一。本研究原核表达出细粒棘球蚴磷酸甘油酸变位酶（rEg-PGAM）,硫氧还蛋白过氧化物酶（rEg-TPx）和rEg-EPC1,建立间接ELISA方法评估三个蛋白与已有
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细粒棘球蚴病（Echinococcosis）又称包虫病,为一种呈世界性分布的人畜共患寄生虫病。我国是包虫病主要流行的国家之一,其主要流行于西北部的农牧地区。介于该病带来的严重经济损失,对于包虫病的诊断是细粒棘球蚴病综合防控的关键步骤之一。本研究原核表达出细粒棘球蚴磷酸甘油酸变位酶（rEg-PGAM）,硫氧还蛋白过氧化物酶（rEg-TPx）和rEg-EPC1,建立间接ELISA方法评估三个蛋白与已有的rEg-P29,rEg-LAP,rEg-DHFR三个重组抗原诊断效果;同时与国内两种商业试剂盒临床检测效果进行对比,筛选出诊断价值较高的重组抗原,为该病临床检测与监控提供技术支持。本研究原核表达并鉴定出rEg-PGAM,rEg-TPx,rEg-EPC1蛋白,免疫印迹结果显示三个蛋白能被自然感染细粒棘球蚴病的绵羊阳性血清识别,说明三个蛋白有较好的免疫原性,可能作为动物细粒棘球蚴病诊断抗原候选。通过建立绵羊包虫病间接ELISA诊断方法,将rEg-PGAM,rEg-TPx,rEg-EPC1蛋白与rEg-P29,rEg-LAP,rEg-DHFR比较诊断效果。结果显示应用重组蛋白rEg-PGAM,rEg-TPx,rEg-EPC1,rEg-P29,rEg-LAP,rEg-DHFR检测27份绵羊包虫病阳性血清敏感性分别为55.6%,92.6%,100%,88%,96.3%和88%;检测15份绵羊抗莫尼茨绦虫阳性血清,20份山羊抗脑多头蚴阳性血清,21份山羊抗细颈囊尾蚴阳性血清,16份山羊抗捻转血矛线虫阳性血清,7份山羊抗肝片吸虫阳性血清和24份阴性血清;特异性分别为86.4%,99.0%,61.2%,92.2%,85.4%和91.3%。同时,用2种国内商业试剂盒对上述27份绵羊包虫病阳性血清和79份交叉反应血清检测,结果显示两种试剂盒均存在敏感性不高（敏感性:70.4%和77.8%）,交叉反应严重的问题（特异性:86.1%和64.6%）。综上所述,以rEg-TPx为抗原建立的间接ELISA方法诊断效果较好,仅与山羊脑包虫阳性血清有一份交叉反应;再用rEg-TPx检测60份免疫了Eg95的绵羊血清,发现没有交叉反应,说明该蛋白可以作为细粒棘球蚴病诊断候选抗原。
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