基于石墨相氮化碳纳米材料的生物小分子荧光及比色检测研究

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近年来,非金属石墨相氮化碳以其优异的生物相容性、化学稳定性、催化活性以及光学活性等特点广泛应用于分析检测领域。本论文利用石墨相氮化碳纳米材料的独特优势,基于静态荧光淬灭以及电子转移原理,构建了简单、快速、高灵敏的传感平台用于生物小分子胆固醇和过氧化氢的检测,进一步拓展了石墨相氮化碳纳米材料在光学生物传感中的应用。主要的研究内容及结论如下:(1)铂负载石墨相氮化碳纳米片(Pt/g-C3N4)用于胆固醇与过氧化氢的比色检测研究。本工作中,我们通过简单的还原法合成了具有优异类过氧化物酶催化活性的铂负载石墨相氮化碳纳米片。研究表明,铂金属的负载使石墨相氮化碳纳米片与催化底物的亲和力提高,并且加速了3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)与过氧化氢之间的电子转移。根据Pt/g-C3N4的优异类过氧化物酶活性和胆固醇氧化酶的特异性催化作用构建级联反应,开发了一种灵敏高选择性的比色检测方法,可在10~800μmol/L(R~2=0.9981)范围内定量检测胆固醇,检出限为9.35μmol/L;在5~200μmol/L(R~2=0.9959)范围内实现过氧化氢的定量检测,检出限可低至5.79μmol/L。此外,我们验证了所构建的基于Pt/g-C3N4的比色传感平台在胎牛血清真实样品检测中的能力。本方法还有望用于以过氧化氢为纽带的许多重要生物分子(如葡萄糖、有机磷、乙酰胆碱酯酶等)的检测。这些结果表明基于Pt/g-C3N4的比色法在临床医学检测中具有广阔的应用前景。(2)石墨相氮化碳量子点(g-CNQDs)作为荧光纳米探针用于胆固醇的快速无酶检测研究。胆固醇的快速高灵敏检测在生命科学和临床医学等方面具有十分重要的研究意义。本工作中,我们通过水热法制备得到了毒性低、光稳定性及水溶性好的石墨相氮化碳量子点,其荧光量子产率高达35%。研究发现所制备的石墨相氮化碳量子点表面的-NH2、-NH与含有-OH的胆固醇之间形成氢键后可使其荧光在30 sec内被胆固醇淬灭90%以上。根据这一现象,开发了一种线性范围宽(0~500μmol/L)、检出限为10.93μmol/L的荧光检测胆固醇方法,本方法具有快速响应且不使用生物酶的优势。此外,所构建的传感方法在多种干扰试剂存在的情况下对胆固醇具有很高的选择性,可用于胎牛血清中胆固醇的测定,具有潜在的临床应用价值。
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