论文部分内容阅读
目的:我们前期研究表明,钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmod ulin-dependent serine protein kinase,CASK)在胰岛β细胞中高表达且参与了胰岛素分泌释放过程,但其具体作用机制及在2型糖尿病中的作用尚不清楚。为在动物水平上验证前期实验结果和深入研究CASK的作用,本研究通过构建条件性胰岛β细胞CASK基因敲除(βCASK KO)小鼠动物模型,对CASK在胰岛β细胞中的功能和对糖代谢的影响进行初步探索。方法:1.使用Cre-loxp基因打靶系统和他莫昔芬诱导构建条件性β细胞CASK基因敲除小鼠;2.对正常饮食βCASK KO小鼠进行代谢表型分析;3.建立高脂饮食诱导的2型糖尿病模型小鼠;4.对高脂饮食βCASK KO小鼠进行代谢表型分析。结果:1.使用Cre-loxp基因打靶系统和他莫昔芬诱导后,qPCR、Western blot、免疫荧光实验结果证实条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠构建成功;2.正常饮食喂养至第16周,βCASK KO小鼠与对照组小鼠相比,体重、血糖、糖耐量、胰岛素敏感性、血清胰岛素水平、GSIS功能以及胰岛大小形态没有明显差异;3高脂饮食喂养小鼠至第16周,体重、血糖、血清胰岛素水平、糖耐量、胰岛素敏感性结果提示2型糖尿病模型小鼠造模成功;4.高脂饮食喂养至第16周,βCASK KO小鼠与对照组小鼠相比,血糖降低、糖耐量改善、胰岛素敏感性增强、高胰岛素血症缓解。结论:1.正常饮食情况下,敲除CASK对小鼠体重、血糖、糖耐量、胰岛素敏感性、血清胰岛素水平、GSIS功能、胰岛素合成没有影响;2.正常饮食情况下,敲除CASK对小鼠胰岛中胰岛素和胰高血糖素含量、胰岛形态大小没有影响;3.敲除CASK可缓解高脂饮食诱导的高胰岛素血症、糖耐量损伤、胰岛素抵抗和高血糖,延缓2型糖尿病的发生发展。