山楂叶为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥叶,主产于我国华北、东北等地。具有抗动脉粥样硬化、降血脂、降糖和抗炎等多种药理作用。山楂叶化学成分复杂多样,主要含有黄酮类、有机酸类等化合物,目前研究多集中于HPLC指纹图谱、多组分含量测定以及总黄酮含量测定等。我们知道,中药次生代谢产物受地理环境、采集时间、气候等条件影响较大,仅对某一类成分进行分析不能全面反映山楂叶的质量。作为代谢组学的分支,植物代谢组学不仅能够研究某些环境下次生代谢产物的变化,还能提供它们与药效活性的相关性,将特定的代谢物与药理药效联系起来,从而对山楂叶进行较全面的质量分析和控制。本研究采用UPLC-Q-TOF/MS技术快速鉴定山楂叶化学成分,建立了山楂叶质谱数据库。采用植物代谢组学对不同月份不同产地山楂叶化学成分进行差异研究,筛选出不同产地差异代谢物。采用p NPG法及DNS法对山楂叶降糖活性进行初步评价,利用偏最小二乘筛选山楂叶降糖药效成分,为山楂叶质量控制及药效研究奠定基础。目的:基于UPLC-Q-TOF/MS建立山楂叶全成分分析方法,完善山楂叶化学成分信息。筛选影响7-11月份不同产地山楂叶的差异代谢物。评价不同产地山楂叶体外降糖活性,筛选与降糖活性潜在相关的化学成分。方法:1.采用ACQUITY UPLC（?）HSS T3（100×2.1 mm,1.8μm）色谱柱,柱温25℃,流动相为0.1%甲酸水-乙腈进行梯度洗脱,流速为0.3 ml/min,进样量2μl。联用ESI正负离子模式检测,根据一级信息,结合参考文献及数据库碎片信息,推测化合物结构。2.采用UPLC-Q-TOF/MS技术分析并获得7-9及10-11月采集的河北承德、辽宁葫芦岛、山东临沂、山西运城产地山楂叶数据集,运用PCA、热图及PLS-DA对采集自7-11月不同产地的147批山楂叶样品进行7-9及10-11月化学成分差异研究,并应用基于差异代谢物的评价模型对14批市售山楂叶进行验证。3.采用pNPG法及DNS法评价147批山楂叶体外降糖活性,并基于第一部分获得山楂叶化学成分,建立PLS模型,筛选出山楂叶中与α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性潜在的相关成分。结果:1.共鉴定山楂叶88种化学成分,包含黄酮类化合物22个、有机酸18个、萜类化合物5个、含氮化合物10个、苯丙素类化合物6个、氨基酸11个、糖7个、维生素2个及其他类化合物7个。2.筛选7-9月不同产地山楂叶差异代谢物55个,10-11月不同产地山楂叶差异代谢物48个,并对市售14批山楂叶的产地进行了很好的区分,14批市售山楂叶主要来源于山东、山西产地。3.山楂叶对α-葡萄糖苷酶及α-淀粉酶均具有一定的抑制作用,不同产地山楂叶对α-葡萄糖苷酶的抑制效果优于α-淀粉酶。筛选出15个与α-葡萄糖苷酶抑制活性潜在相关的化学成分,其中呈正相关的有7个化合物,负相关的有9个化合物,一个重复成分;14个与α-淀粉酶抑制活性潜在相关的化学成分,其中呈正相关的有11个化合物,负相关的有3个化合物。结论:建立了基于UPLC-Q-TOF/MS的山楂叶快速定性分析的方法,进一步明确了山楂叶的物质基础,为山楂叶的药效物质研究提供科学依据。基于植物代谢组学方法,可简便、快速地对不同产地和不同采集时间山楂叶进行化学成分差异研究,为山楂叶的质量评价提供理论依据。初步评价了山楂叶体外降糖活性,筛选了与降糖潜在相关的活性成分,为进一步拓展山楂叶降糖活性及其临床开发提供技术支持。