常温氧合血灌注保猪供心的实验研究

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第一部分常温氧合血灌注保存猪供心模型建立  目的:本实验旨在初步建立供心氧合血灌注保存的动物模型,把握实验关键细节,借此初步评估此种保存方式与传统冷藏保存相比是否具有优越性。  方法:雄性中华小型猪6头,体重30±3Kg,随机分为两组:灌注保存组(MP组),4头,4℃ST.Thomas液灌停获取心脏,常温氧合血连续灌注保存8h。监护仪监测心率,CDI500连续动脉血气分析仪监测保存期间温度、pH值、PO2、PCO2、Na+浓度、K+浓度、Ca2+浓度,各时间点抽取动脉血监测动脉血气、随机血糖、ACT。冷藏保存组(CS组),2头,4℃Celsior液灌停获取心脏,浸泡在装有4℃Celsior液的无菌袋中冷藏保存8h。两组8h后分别取左室心肌组织进行光镜观察,取左室心内膜组织进行电镜下超微结构观察。  结果:  1 MP组保存的心脏均实现自主节律复跳,跳动保存8h。  2光镜下观察,氧合血灌注保存组心肌肌纤维更加整齐,间质无明显肿胀。  3电镜超微结构观察,氧合血灌注保存组肌纤维排列整齐,结构整齐清晰,线粒体嵴清晰,Celsior液冷藏保存组线粒体嵴融合,有空泡样改变,线粒体有增多聚集。  结论:供心常温氧合血灌注保存8h是完全可行的,动物模型成功建立,此种保存方法可以延长供心保存时限。  第二部分供心灌注保存与Celsior液冷藏保存心肌超微结构及细胞凋亡的研究  目的:常温氧合血灌注保存8h与Celsior液冷藏保存8h心脏超微结构及细胞凋亡研究对比,验证氧合血连续灌注心脏保存与冷藏保存相比是否具有优越性。  方法:12头中华小型猪随机分为两组:灌注保存组(MP组),6头,常温氧合血连续灌注保存8h;冷藏保存组(CS组),6头,浸泡在装有Celsior液的无菌袋中4℃冷藏保存8h。分别取左室心肌组织进行光镜观察,并制作蜡块,切取白片TUNEL法进行原位细胞凋亡检测,取左室心内膜组织进行电镜下超微结构观察。  结果:电镜超微结构观察,Celsior液冷藏保存组线粒体嵴融合,有空泡样改变,线粒体有增多聚集,MP组线粒体更加完好,肌小节较冷藏保存组更加整齐清晰,溶酶体较冷藏保存组少。TUNEL法检测细胞原位凋亡结果:MP组心肌细胞凋亡数量与正常心肌无显著性差异;CS组心肌凋亡细胞明显增多,与MP组有显著性差异。  结论:心脏常温氧合血灌注保存较冷藏保存能够减轻心肌损伤,保护待移植心脏功能。
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