日本血吸虫热休克蛋白60增强CD4+CD25+Treg细胞免疫抑制功能及机制研究

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目的探讨日本血吸虫热休克蛋白60(Sj HSP60)对小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)免疫抑制功能的影响及其可能机制。方法首先通过ex vivo和in vitro研究,采用细胞增殖实验探究Sj HSP60对Treg细胞免疫抑制功能的影响。并采用流式细胞术和ELISA检测Sj HSP60刺激后,Treg细胞IL-10和TGF-β的表达水平。进一步结合transwell细胞培养装置,仍通过ex vivo和in vitro研究、细胞增殖实验探究Sj HSP60促进Treg细胞抑制功能的可能机制。然后,采用流式细胞术检测Sj HSP60刺激后与Treg细胞免疫抑制功能相关的Foxp3和CTLA-4的表达水平。最后,采用皮下注射进行in vivo研究,通过病理学检测(H&E染色和天狼星红染色)及血清酶学检测证实Sj HSP60在血吸虫感染小鼠体内对肝脏病理损害的保护作用。结果Sj HSP60刺激后Treg细胞主要通过抑制性细胞因子IL-10和TGF-β发挥免疫抑制功能。且Sj HSP60可以促进Treg细胞免疫抑制功能增强,主要机制可能为Sj HSP60可诱导Treg细胞的IL-10和TGF-β表达水平显著上调;进一步还发现Sj HSP60可诱导Treg细胞的Foxp3和CTLA-4的表达水平显著增加。最后通过in vivo实验发现,Sj HSP60注射可以显著减轻血吸虫感染小鼠肝脏虫卵肉芽肿和纤维化,并明显降低感染小鼠血清中AST和ALT的水平。结论Sj HSP60可通过促进Treg细胞分泌IL-10和TGF-β增强其免疫抑制功能,这可能是由于其诱导Treg细胞表达Foxp3和CTLA-4进而分别促进IL-10和TGF-β的表达,最终减轻了血吸虫感染导致的肝脏免疫病理损害。
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