活血通络汤对脑缺血再灌注大鼠的保护作用

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目的:缺血性脑卒中是神经系统常见病、多发病,其死亡率和致残率都很高,幸存者多伴有智能和体能障碍,给社会和家庭带来沉重负担。中药方剂活血通络汤是以传统气血理论为基础,经多年实践总结创新出来的具有防治缺血性脑卒中作用的经验方,经临床大量病例验证疗效满意。本研究采用血清学方法、放射免疫法等研究方法初步探讨活血通络汤的作用机制,为其进一步推广应用提供理论依据。方法:选取健康Wistar大鼠50只,体重250-300g,雌雄各半。随机分为5组每组10只,即:假手术组、模型组、中药小剂量组(25g生药/kg)、中药大剂量组(50g生药/kg)和尼莫地平组(10mg/kg)。小剂量组、大剂量组和尼莫地平组灌胃给药(10ml/kg)每天1次,连续14天,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃。各组最后一次给药后12小时禁食不禁水,12小时后除假手术组外均按颈动脉分流法造模,用乙醚麻醉颈正中切口,并分离左侧股静脉。从股静脉注射肝素(625u/ml)0.3ml并插微细聚乙烯导管与微型输液器相连。从右侧颈总动脉的远心端插入自制聚乙烯导管,导管夹闭,导管下连贮液器,微动脉夹夹闭左侧颈总动脉,同时从右侧颈总动脉导管放血,收集流出的血液并从左侧股静脉回输体内,此为缺血期。松开左颈总动脉动脉夹,右侧颈总动脉停止放血,此为再灌注期。模型组、小剂量组、大剂量组、尼莫地平组均缺血20分钟再灌注24小时后断头取血,测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)。断头取脑后去除嗅球、小脑和低位脑干后称湿重,计算脑指数。取左侧一半脑组织称湿重后置于110℃烘箱内干燥24小时至恒重,计算脑含水量,剩余的右侧一半脑组织匀浆后测ET和CGRP。结果1脑含水量和脑指数1.1脑含水量模型组较假手术组脑含水量显著升高,且差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较小剂量组大剂量组和尼莫地平组脑含水量显著下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。小剂量、大剂量、尼莫地平组之间差异无统计学意义(P>0.05)。1.2脑指数模型组较假手术组明显升高(P <0.05),与模型组比较小剂量组大剂量组和尼莫地平组脑指数显著下降,且差异有统计学意义(P <0.05),小剂量、大剂量、尼莫地平组之间差异无统计学意义(P>0.05)。2对血浆SOD、MDA的影响2.1血浆SOD模型组SOD含量较假手术组明显下降,且差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较小剂量组SOD升高有统计学意义(P <0.05)、大剂量组、尼莫地平组SOD升高有统计学意义(P <0.01),大剂量组与小剂量组比较SOD升高且差异均有统计学意义(P<0.05)。2.2血浆MDA模型组MDA含量较假手术组明显升高,且差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较小剂量组、大剂量组、尼莫地平组MDA明显下降,且差异有统计学意义(P<0.05),小剂量、大剂量、尼莫地平组之间差异无统计学意义(P>0.05)。3血浆ET、CGRP3.1血浆ET模型组与假手术组比较血浆ET含量升高,差异有统计学意义(P <0.05),与模型组比较,小剂量组、大剂量组、尼莫地平组ET降低,差异有统计学意义(P <0.05)。大剂量组与尼莫地平组比较ET含量下降且差异有统计学意义(P < 0.05)。3.2血浆CGRP模型组与假手术组比较血浆CGRP含量降低,差异有统计学意义(P <0.05),与模型组比较,小剂量组、尼莫地平组CGRP含量升高,差异有统计学意义(P <0.05),大剂量组CGRP含量升高,差异有统计学意义(P <0.01)。小剂量、大剂量、尼莫地平组之间差异无统计学意义(P >0.05)。4脑组织ET、CGRP4.1脑组织ET模型组与假手术组比较脑组织ET含量升高,差异有统计学意义(P <0.05),与模型组比较,大剂量组、小剂量组ET含量降低,差异有统计学意义(P <0.05)。尼莫地平组与模型组比较ET含量降低,差异有统计学意义(P <0.01)。小剂量、大剂量、尼莫地平组之间差异无统计学意义(P >0.05)。4.2脑组织CGRP模型组与假手术组比较CGRP含量降低,差异有统计学意义(P <0.05),与模型组比较,小剂量组、尼莫地平组CGRP含量升高,差异有统计学意义(P <0.05)大剂量组CGRP含量升高,差异有统计学意义(P <0.01)。小剂量、大剂量、尼莫地平组之间差异无统计学意义(P >0.05)。结论:大鼠全脑缺血再灌注后脑组织清除氧自由基的能力降低,氧自由基损伤加重。脑组织和血液中缩血管物质ET增多,舒血管物质CGRP减少,引起血管收缩,脑组织水肿。活血通络汤能减少脂质过氧化物MDA生成,减轻脑缺血再灌注后的自由基损伤,还可抑制脑缺血再灌注后SOD活性下降,通过抑制ET、升高CGRP改善脑组织血液循环,减轻脑水肿。
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