目的本研究的目的是探讨CD4⁺CD25^highCD127^low调节性T细胞（T-regs）在再生障碍性贫血（AA）病理生理学中的作用以及雄激素对AA患者T-regs的影响;并进一步探讨雄激素对AA患者端粒、端粒酶系统的影响以及端粒酶基因突变、端粒长度、端粒酶活性在AA发病机制中的作用。方法依据AA临床诊断标准收集患者,根据患者个体情况按照诊疗标准予以对症治疗,⑴分为ATG+环孢素（CsA）、CsA+达那唑（DAN）及达那唑三组,分别采集患者外周血标本,采用多色流式细胞术对外周血标本进行T-regs计数,并计算T-regs/CD4⁺T淋巴细胞百分率（T-regs%）,并与健康对照组进行比较;⑵分为CsA+司坦唑醇及CsA两组,a.采用核酸提取仪及核酸提取试剂盒提取外周血基因组DNA;b.利用实时荧光定量PCR检测外周血白细胞端粒相对长度;c.利用酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法检测端粒酶活性;d.利用PCR扩增TERT、TERC基因,产物进行纯化、测序、分析,并与健康对照组进行比较。结果第一部分⑴25例AA患者确诊时平均T-regs%值（3.45±1.33%）与对照组（7.90±0.99%）比较差异有显著性（P<0.0001）。治疗3个月后,所有患者的平均T-regs%值显著升高（6.70±1.99%）（P<0.0001）。其中,13例患者无反应,11例部分缓解,1例完全缓解,反应组T-regs平均上升率高于无反应组（p=0.613）。⑵治疗3个月后,三组T-regs%值均升高,三组治疗前后差异具有显著性（p<0.0001）,但组间比较无显著性差异（p=0.585）。⑶单因素分析未发现T-regs%值变化的显著预测因子。第二部分⑴30例AA患者有1例发生TERC1突变,15例正常对照组均未发现TERT1、TERT2及TERC1基因突变。实验组及正常健康对照组均发现TERT及TERC基因的多处单核苷酸多态性（SNP）位点。⑵AA患者基线端粒长度相对T/S比率为0.765±0.271,较正常健康对照组0.978±0.344明显缩短（P=0.028）。治疗后12个月,CsA+雄激素组端粒长度相对T/S比率高于CsA组（P=0.017）。⑶实验组患者基线端粒酶活性（OD值）平均值为0.30±0.16,显著高于正常健康对照组（0.11±0.06）。CsA+雄激素组端粒酶活性（OD值）在治疗后3⁶个月逐步降低,9¹2个月显著升高,但与CsA组比较无显著性差异。⑷CsA组治疗后3个月,3例患者（20%）出现血液学反应,6个月后6例患者（40%）出现血液学反应,此后直至随访至12个月均未出现新血液学反应;CsA+雄激素组治疗后3个月,8例患者（53.3%）出现血液学反应,6个月后10例患者（66.7%）出现血液学反应,9个月后11例患者（73.3%）出现血液学反应,12个月获得血液学改善患者为12例（80%）。CsA+雄激素组血液学改善优于CsA组,两组比较有显著性差异（P=0.03）。⑸实验组患者治疗期间均未出现3级或4级药物不良事件,1例患者（3.3%）出现“肝脏良性占位”,1例患者（3.3%）出现轻度肾功能损害,2例患者（6.7%）出现轻度肝功能损害。结论1、T-regs在AA的病理生理过程中起着重要作用。雄激素可能具有免疫调节作用,但其对AA的免疫机制可能主要是它对端粒系统的影响,这正是我们需要进一步深入研究的方向。总的来说,达那唑作为一种减弱的雄激素可能具有免疫调节潜力。2、雄激素可以调节AA患者端粒酶活性和端粒长度,且雄激素治疗后端粒长度的增加与雄激素对端粒酶活性的调节是一致的。雄激素在治疗AA伴端粒功能障碍方面是有效的,可以获得有临床意义的血液学改善,且无严重毒副作用。