长链非编码RNA LINC00662在肝细胞癌中的表达及其临床意义

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目的:研究长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)LINC00662在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达水平及其临床意义,探究LINC00662对HCC细胞增殖的影响,探讨LINC00662在HCC发生发展中的作用。方法:(1)利用R软件分析肿瘤基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中肝细胞癌患者的RNA测序数据及随访信息,比较LINC00662在肝细胞癌组织和癌旁正常组织的表达差异,并采用Kaplan-Meier法绘制生存分析曲线,分析LINC00662表达水平与肝细胞癌患者预后的关系。(2)选取2021年2月1日至2021年7月1日于吉林大学白求恩第一医院接受根治性手术切除的肝细胞癌患者70例,应用逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)检测这些患者的癌组织及癌旁组织中LINC00662的表达水平,比较二者表达差异,并采用Pearsonχ2检验探究LINC00662表达水平与患者临床病理特征间的关系。(3)应用RT-PCR检测正常肝细胞系(Lo2)及肝癌细胞系(SMMC-7721和HepG2)中LINC00662表达水平。(4)设计干扰LINC00662表达的质粒(sh RNA),利用瞬时转染技术,转染肝癌细胞系(SMMC-7721和HepG2),使用荧光显微镜观测转染效率,并使用RTPCR验证敲降效果,同时设立空白对照组(sh-NC组)。(5)使用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验探讨LINC00662对肝细胞癌细胞增殖的影响。结果:(1)基于TCGA数据库中的数据分析,LINC00662在肝细胞癌组织中表达显著上调(P<0.001),且LINC00662高表达的患者预后相对较差(P<0.01)。(2)临床组织样本检测验证了LINC00662在肝细胞癌组织中表达上调,并且LINC00662的表达水平与肿瘤的分化程度、脉管浸润和淋巴结转移呈正相关。(3)LINC00662在肝癌细胞系(SMMC-7721和HepG2)中表达显著高于正常肝细胞系(Lo2)。(4)下调SMMC-7721和HepG2细胞系中LINC00662的表达后,肝癌细胞系的增殖明显受到抑制。结论:(1)LINC00662在肝细胞癌组织及细胞系中呈高表达,LINC00662的高表达与HCC患者的不良预后相关;(2)LINC00662在肝细胞癌组织中的表达水平与患者肿瘤的分化程度、脉管浸润和淋巴结转移呈正相关;(3)LINC00662表达下调可以抑制肝癌细胞的增殖。
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