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大花蕙兰(Cymbidium hybridium)为兰科兰属多年生草本,是世界上栽培最普及的洋兰之一,是一种具有极高观赏价值的兰属植物,其主要的繁殖方法有种子繁殖、分株繁殖和组织培养。本研究以大花蕙兰‘钢琴家’(Cymbidium Fortissimo’Pianist’)、‘红宝石’(CymbidiumRuby Shower ’Murasakin Okimi’)为材料,针对大花蕙兰离体快繁中的外植体灭菌、原球茎诱导、原球茎同步发育等问题,以茎尖为外植体,探讨了原球茎诱导及同步发育等问题:并以原球茎为材料,用秋水仙素作多倍体诱变研究,最后通过形态观察、细胞学观察、染色体鉴定等方法对大花蕙兰多倍体进行鉴定,判断诱变是否有效。主要研究结果如下:(1)外植体接种的前遮光处理和接种后低温处理处理都可以有效的减轻外植体褐化程度;在原球茎诱导中,培养基和6-BA用量是影响诱导率的主要因子,最佳诱导培养基为KC+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+AC2mg/L,诱导率最高达53.3%。(2)在控制原球茎同步发育的实验中,接种密度对大花蕙兰增殖倍数和分化率影响极显著,在1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+AC1.0g/ml培养基上,接种密度为8个/cm~2时,增殖倍数最高达4.8倍;在培养基1/2MS+6-BA1.0mg/l+NAA0.2mg/L+AC1.0g/L上,接种密度为2个/cm~2时,分化率最高达60.35%。(3)用秋水仙素浸泡法对原球茎诱导多倍体时,用3%浓度的秋水仙素处理48h时,诱变率最高达23.3%,过高的浓度和过长的处理时间都会加重对原球茎的伤害,造成较高的死亡率。(4)秋水仙素混培法对原球茎诱导多倍体时,1%秋水仙素处理40d或3%处理30d时,诱变效果较好,达27.8%和30.0%。(5)秋水仙素混培法对大花蕙兰丛芽诱导多倍体时,秋水仙素对丛芽的毒害整体较大,死亡率较高,5%的秋水仙素处理40d后,死率高达84.44%:3%的秋水仙素处理40d时,诱变率最高为15.56%。(6)大花蕙兰根尖染色体压片表明,由秋水仙诱导获得的大花蕙兰多倍体植株为四倍体,其染色体数为2n=4x=80。大花蕙兰四倍体与二倍体在外形上有明显区别,多倍体植株茎壮、叶片宽厚、叶色浓绿、且生长发育缓慢;在细胞学上,多倍体植株与二倍体植株相比,气孔增大,单位面积气孔数减少,叶绿素增加。