显齿蛇葡萄离体培养物与植株不同部位二氢杨梅素含量的比较

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:haludahuaidan
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显齿蛇葡萄是工业上提取二氢杨梅素的主要原材料之一,二氢杨梅素具有多种药理活性作用。本论文利用显齿蛇葡萄的不同部位作为外植体,深入研究了显齿蛇葡萄的细胞与组织培养技术,并测定了其培养物与野生植株不同部位中二氢杨梅素的含量,并对结果进行了比较分析。论文研究了显齿蛇葡萄愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的基本条件。确定愈伤组织诱导的基本条件为:以显齿蛇葡萄叶片、叶柄、茎段、茎尖等作为外植体进行的愈伤诱导,叶片明显优于其它材料,且以叶片正面向上培养为佳。经过单因素试验和正交试验得出最佳的培养条件是MS+6-BA(1.5 mg/L)+KT(0.15mg/L)+NAA(0.2 mg/L)+2,4-D(2 mg/L)+椰子汁(100 mL/L)+蔗糖(2%)+琼脂(0.7%),在光照强度为250 Lx-350 Lx培养14 h/d,愈伤组织诱导率最高。细胞悬浮培养的基本条件是:取继代培养4代之后的愈伤组织接种,以12.5g/L的接种量接种在附加6-BA(2.0 mg/L)、2,4-D(1.0 mg/L),NAA(0.5 mg/L)的MS培养基上,添加100 ml/L的椰子汁,起始pH 5.8,110 r/min,光照强度为250Lx-350 Lx,光照培养12 h/d,25±1℃下培养6 d,显微观察结果表明继代4次的细胞悬浮培养生长最好。论文比较了显齿蛇葡萄细胞与组织培养及培养物和对照植株不同部位中二氢杨梅素的含量。采用高效液相色谱法测定显齿蛇葡萄的成熟叶片、果实、悬浮培养液、嫩叶、愈伤组织、老叶中的二氢杨梅素的含量。成熟叶片、果实、悬浮培养液、嫩叶、愈伤组织、老叶中二氢杨梅素的含量分别为:13.709%、6.255%、0.829%、25.528%、11.616%、13.337%。结果表明愈伤组织中二氢杨梅素含量与成熟叶片中含量接近,悬浮液中含量很低,可以尝试运用愈伤组织培养法生产二氢杨梅素。
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