论文部分内容阅读
在前期工作的基础上,以大豆蛋白酶解产物为研究对象,考察大豆源降血压肽活性稳定性及安全性。主要通过体内和体外检测来评价降压肽的活性,即ACE抑制活性检测和灌胃原发性高血压大鼠(SHR)后的降压活性检测。酶解反应体系由1L逐步放大到5L,检测其体外和体内活性变化情况;初步研究温度和pH对水解物产品体内外活性的影响;以热杀菌、无菌过滤、减压浓缩以及冷冻干燥等方法处理水解物,检测其体外和体内活性变化情况,并考察热杀菌样品、无菌过滤样品以及冻干品贮藏期间的体内外ACE抑制活性情况;此外,还对水解物灌胃剂量和降血压效果关系进行了研究。以酶解浓缩溶液灌胃KM小鼠,对其进行急性毒理分析。体外检测结果表明:酶解反应体系由1L放大到5L,ACE活性抑制率均达到80%以上;水解物在30℃~90℃下处理2h后,ACE抑制活性与原样相同;调整水解物pH至4~10,50℃下处理2h后,体外活性保持稳定;热杀菌处理中,85℃、100℃处理1h,其ACE抑活性保持稳定;121℃加热30min以上,活性抑制率降至59.69%;水解物pH调至4.5和5.4,经相同热杀菌处理后,结果大致相同;无菌过滤产品抑制率为85.85%,浓缩液和冷冻品调整至原来浓度后其活性抑制率分别为84.47%,84.9%;热杀菌样品、无菌过滤产品和冻干品在180d贮藏期间,其ACE活性抑制率未发生显著性变化。体内检测结果表明:水解物灌胃SHR,2h后最大降压值(P<0.05)为18.2mmHg;经热杀菌处理后样品灌SHR,降压效果明显下降;酶解液85℃、处理15min,其最大降压值(P<0.05)仅为11.6mmHg,而其它样品降压值均在10mmHg以下;减压浓缩、冷冻干燥、无菌过滤等方法处理后的样品,最大降压值(P<0.05)分别为17.9mmHg、18.8mmHg、18.4mmHg;灌胃剂量增大至4倍后,降压效果不再改变;在90d贮藏中,无菌过滤样品和冻干品均保持体内活性稳定性。体外活性检测与体内试验差异说明:与原液相比,肽液中肽组成在热作用下发生变化,使得肽在体内代谢后抵达靶器官或组织后,仅保留了较少的有效肽成分。急性毒理试验表明:大豆蛋白酶解物不具有毒性。