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本文研究的核心内容是围绕大规模制备药用质粒DNA这一主题展开的.它主要是以含有pcDNA3的E.coli DH5 α菌株为对象,系统的对发酵,常规的细胞裂解方法以及大规模制备质粒DNA的非色谱纯化的方法——CTAB法进行研究.从摇瓶小试到10L发酵罐中试,研究了搅拌转速、接种量、培养时间等发酵参数及葡萄糖、抗生素、无机盐等成分对菌体浓度和质粒产量的影响,优选出最佳的培养基和培养条件.其次,针对含有pcDNA3的E.coli DH5 α菌株研究常规质粒DNA粗提方法,确定碱裂解方法为最适宜的方法.在大量制备质粒DNA(500mL)的过程中,质粒产量为2.18mg,收率为75.65%,稳定性与重复性均较好.最后研究了基因治疗用载体质粒DNA的一种非色谱的大规模纯化方法——CTAB沉淀法,并对这种方法进行了工艺优化.