论文部分内容阅读
目的:观察疏肝补肾方对心理应激所致胚胎着床障碍的作用以及疏肝补肾方对CD4~+Foxp3~+Treg细胞的影响。方法:实验采用异基因交配(BALB/c×C57BL/6)孕鼠进行。SPF级BALB/c雌性小鼠,2月龄。SPF级C57BL/6雄性小鼠,3月龄,用于与雌BALB/c小鼠同笼交配。SPF级SD雄性大鼠,300g,用于给小鼠造成心理应激。分为正常对照组、心理应激组、心理应激+疏肝组、心理应激+补肾组、心理应激+疏肝补肾组,每组24只,其中心理应激组、心理应激+疏肝组、心理应激+补肾组、心理应激+疏肝补肾组于妊娠第2日至第5日予以连续心理应激;心理应激+疏肝组、心理应激+补肾组、心理应激+疏肝补肾组自应激之日起予以中药灌胃。后短颈法处死孕鼠或1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉孕鼠,注射剂量为0.06g/kg。取其中12只小鼠髂窝淋巴结、切取脾脏,研磨后,分别用于流式细胞检测Treg细胞比例。结果:(1)疏肝补肾方对各组妊娠小鼠着床的影响:与正常对照组相比,妊娠第5.5天和妊娠第8.5天心理应激组小鼠着床位点数和着床胚胎数显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与心理应激组相比,妊娠第5.5天和妊娠第8.5天心理应激+疏肝组、心理应激+补肾组小鼠着床位点数和着床胚胎数显著升高(P<0.05);与心理应激+疏肝组、心理应激+补肾组相比,妊娠第5.5天和妊娠第8.5天心理应激+疏肝补肾组小鼠着床位点数和着床胚胎数亦有所升高,差异有统计学意义(P<0.05);而心理应激+疏肝补肾组妊娠第5.5天和妊娠第8.5天小鼠着床位点数和着床胚胎数低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与心理应激+疏肝组相比,妊娠第5.5天和妊娠第8.5天心理应激+补肾组小鼠着床位点数和着床胚胎数无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)疏肝补肾方对各组妊娠第5.5天小鼠不同部位CD4~+Foxp3~+Treg细胞所占比例的影响:与正常对照组相比,妊娠第5.5天心理应激组小鼠脾脏、髂窝淋巴结CD4~+Foxp3~+Treg细胞所占比例显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与心理应激组相比,妊娠第5.5天心理应激+疏肝组、心理应激+补肾组小鼠脾脏、髂窝淋巴结CD4~+Foxp3~+Treg细胞所占比例显著升高(P<0.05);与心理应激+疏肝组、心理应激+补肾组相比,妊娠第5.5天小鼠脾脏、髂窝淋巴结的CD4~+Foxp3~+Treg细胞所占比例亦有所升高,差异有统计学意义(P<0.05);而心理应激+疏肝补肾组妊娠第5.5天小鼠脾脏、髂窝淋巴结的CD4~+Foxp3~+Treg细胞所占比例低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与心理应激+疏肝组相比,妊娠第5.5天心理应激+补肾组小鼠脾脏、髂窝淋巴结的CD4~+Foxp3~+Treg细胞所占比例无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:心理应激可导致妊娠第5.5天和妊娠第8.5天的小鼠着床位点数和着床胚胎数下降,亦可使妊娠第5.5天的小鼠脾脏、髂窝淋巴结的CD4~+Foxp3~+Treg细胞比例减少,而使用疏肝补肾方可增加妊娠第5.5天和妊娠第8.5天心理应激小鼠的着床位点数和着床胚胎数,亦可提高妊娠第5.5天和妊娠第8.5天心理应激小鼠的脾脏、髂窝淋巴结的CD4~+Foxp3~+Treg细胞所占比例。疏肝补肾方可能通过增加妊娠小鼠体内CD4~+Foxp3~+Treg细胞所占的比例促进胚胎着床。