人参叶皂苷生物转化的研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kmyzchenpeng
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本论文首先以人参叶总皂苷为原料,用AB-8大孔吸附树脂对PPD和PPT进行分离;并用硅胶柱层析法分离人参叶皂苷PPD制备单体F2;然后用人参皂苷Ⅰ型酶水解F2和Rd生成C-K,并比较了水解效率;再以Rb1为底物,探究了在人参皂苷Ⅱ型酶作用下转化生成C-K的最佳条件;最后研究了人参自身提取物对叶皂苷PPD的水解作用。以两种不同浓度的乙醇为洗脱液,利用AB-8大孔吸附树脂对分离人参叶皂苷的PPD和PPT进行分离,低浓度乙醇(36%)洗脱液中主要成分是Re和Rg1,也有少量Rd、F2等二醇类皂苷;高浓度乙醇(60%)洗脱下来的组分主要为Rd,F2等二醇类皂苷,并带有少量Rg1,无Re。50g人参叶PPD经硅胶柱层析分离,可得到10g人参皂苷F2,得率为20%,纯度93.01%。分别以单体皂苷F2、Rd为底物,利用人参皂苷Ⅰ型酶进行转化,都可以生成稀有人参皂苷C-K。sp.48菌经诱导发酵产生的人参皂苷Ⅰ型酶可水解Rb1生成C-K,整个转化过程为:Rb1→Rd→F2→C-K。通过对转化条件的优化,发现该酶液在60℃与1%的底物Rb1反应3-4h,生成C-K的转化率最高;人参自身酶等提取物,可以水解人参叶皂苷PPD,产物以Rg3为主,也有少量Rh2生成。
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