内皮祖细胞的分离培养及生物学特性的鉴定

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目的 取大鼠骨髓,分离骨髓单个核细胞(MNCs),用血管内皮生长因子(VEGF)加以诱导,进行体外培养,纯化内皮祖细胞(EPCs),鉴定EPCs的生物学特性。 方法 密度梯度离心法采集大鼠骨髓单个核细胞,分为VEGF诱导组和非诱导组进行体外培养,应用免疫细胞化学和流式细胞术分别鉴定其生物学特性。 结果 MNCs经过培养,形成线样结构和类血管样结构,表达EPCs特异性抗原CD133和内皮细胞(ECs)的特异性抗原Ⅷ因子、Flk-1、和CD34,提示培养细胞同时具有EPCs和ECs的表面蛋白特性,且诱导组阳性细胞数多于非诱导组,形成特殊结构的时间早于非诱导组。 结论 ①通过分离骨髓MNCs进行诱导培养可以提高EPCs的纯度。②VEGF可促进EPCs的增殖和血管样结构的形成。③体外培养一周左右是EPCs增殖的高峰期。
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