【摘 要】
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目的：利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默肝癌细胞中Cat S基因后,观察其对多柔比星敏感性的变化。方法：1、设计一对针对Cat S基因的siRNA,转染人肝癌细胞MHCC97-H,靶
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目的：利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默肝癌细胞中Cat S基因后,观察其对多柔比星敏感性的变化。方法：1、设计一对针对Cat S基因的siRNA,转染人肝癌细胞MHCC97-H,靶向沉默Cat S基因作为实验组,同时设空载体的阴性对照组和空白组(未转染),western blot检测沉默后三组Cat S的表达情况。2、给予不同浓度的多柔比星在多个时间段培养实验组和阴性对照组细胞,MTT筛选出两组细胞抑制率差异性最大的一对用于下一步实验。3、Western bolt检测此组细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达水平。结果：1、RNAi技术沉默人肝癌细胞MHCC97-H中Cat S基因后,实验组中Cat S的表达水平,与对照组和空白组比较,p值均为0.000(P<0.05)有统计学差异,而对照组与空白组比较无差异(p>0.05)。2、当多柔比星浓度达到32ug/ml干预24小时后,实验组与阴性对照组细胞抑制率差异最大p1.58E-5(p<0.01),且随着多柔比星浓度与干预时间的递增,两组细胞抑制率呈上升趋势,当其浓度为64ug/ml干预36小时后,两组细胞全部凋亡。3、多柔比星浓度为32ug/ml干预实验组与对照组24小时后,比较凋亡蛋白Caspase-3的水平,实验组明显高于阴性对照组p0.000(p<0.05),差异有统计学意义。结论：沉默人肝癌细胞中Cat S基因的表达能增强对多柔比星的敏感性。
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