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目的:1.探究在静压力作用下，不同作用时间点的人牙龈成纤维细胞(HGFs)表达钙网蛋白(CRT)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的情况。2.探究shRNA沉默HGFs中CRT的表达后，TGF-β1表达的变化情况，分析CRT对HGFs表达TGF-β1的影响，以初步研究CRT在纤维化转导信号通路中的作用机制。 方法:1.组织块培养法培养出原代HGFs，传代后，取第4-6代细胞接种在PLGA支架上，建立HGFs-PLGA支架复合培养模型以构建三维培养模式。2、采用重物加载法对此复合培养模型加载25g/cm2的力，按加力时间分为0h，6h，24h，48h，72h组，对照组为0h（未加力）组。通过实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测各加力组CRT、TGF-β1的基因相对于未加力组的表达情况，通过蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各加力组CRT、TGF-β1的蛋白相对于未加力组的表达量。3.构建重组腺病毒rAdE5-CRT1p2-shRNA，用重组腺病毒转染第4代的HGFs，以沉默HGFs中CRT的表达，CCK-8法检测腺病毒转染对HGFs增殖能力的影响。转染72h后，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达量，计算转染效率，RT-qPCR、Western Blot检测沉默效率。4.检测沉默HGFs中CRT的表达后，TGF-β1的mRNA及蛋白的表达情况。 结果:1.组织块培养法成功培养出原代HGFs，传代顺利，并完成HGFs-PLGA支架复合培养模型的构建。2.随着加力时间的延长，HGFs中CRT、TGF-β1的基因和蛋白的表达量升高，在24h升到最高，随后逐渐降低。3.转染72h后，沉默组转染效率达到88.101±0.058％，阴性对照组转染效率达到88.359±0.022％。4、CCK-8结果显示，转染组、空白对照组的OD值均随时间延长呈上升的趋势;比较相同天数转染组与空白组的OD值，差异无统计学意义。5、Ad-shRNA组的CRT、TGF-β1mRNA和蛋白表达量较空白对照组明显下降。 结论:1.静压力可促进HGFs中CRT、TGF-β1的表达，随着加力时间的延长，两者的表达水平均增高，到达峰值后下降。2.CRT对HGFs中TGF-β1的生成有重要作用。