目的：采用D-半乳糖致亚急性衰老大鼠模型,用琼玉膏干预,取下丘脑作为研究部位,用蛋白质组学中的同位素相对标记与绝对定量(iTRAQ)技术,探索琼玉膏对衰老大鼠产生调节作用的相关蛋白质,对这些蛋白质进行生物信息学分析,进一步确定琼玉膏对衰老大鼠下丘脑作用的候选靶蛋白,从而在分子水平上探索琼玉膏的作用机制,为进一步研究琼玉膏药物作用靶点和干预提供实验基础,并对琼玉膏制剂的开发利用提供理论依据。方法：将42只6月龄SD雄性大鼠随机分为3组,每组14只,分笼饲养每笼七只,标记为琼玉膏组、空白组和模型组。模型组每天以D-半乳糖按300 mg/(kg · d)进行腹腔注射,制造亚急性衰老模型,琼玉膏组与模型组相同,即从实验第一天开始,以D-半乳糖按300 mg/(kg·d)进行腹腔注射,空白对照组则相同方法和剂量给予生理盐水；同时琼玉膏组每天给予灌胃琼玉膏0.583 ml/(100g·d),模型组和空白对照组则给予灌胃生理盐水0.583 ml/(100g·d),连续用药40天。停药后取血清和肝脏,进行抗氧化能力测试评价造模情况。同时提取大鼠下丘脑全蛋白,利用iTRAQ技术,通过蛋白质酶解、肽段标记、高pH反向液相色谱分离、质谱检测等方法,确定显著差异蛋白。结合基因本体论注释(Gene Ontology)、KEGG通路分析和蛋白作用网络等相关生物信息学分析,对差异蛋白的功能和属性、代谢通路和互作网络进行分析研究,最终确定与琼玉膏作用相关的候选靶蛋白。结果：1.成功建立亚急性衰老大鼠模型,模型组大鼠肝脏中SOD活力、血清中GSH-Px活力值较空白组显著降低,结果具有统计学意义。2.琼玉膏组与模型组比较,大鼠肝脏中SOD活力、血清中的GSH-Px活力值升高,结果具有统计学意义。3.经过蛋白质组学中iTRAQ技术的处理,分析比较三组中表达量发生变化的蛋白,发现14种显著差异蛋白质。这些蛋白有,细胞色素c氧化酶多肽VIc-2、中性神经酰胺酶、植烷酸-辅酶A羟化酶相互作用类蛋白、尼克酰胺磷酸核糖转移酶、尾锚定蛋白插入受体WRB、O甘露糖β-1,4-N-乙酰葡糖胺基转移酶、信号转导子和转录激活子5b、脂酰CoA合成酶、特定微管伴侣蛋白E、3-磷酸肌醇依赖的蛋白激酶1、双特异性作用蛋白激酶7、RAS脒基释放蛋白2、SHC转运蛋白和泛酸酯激酶4,琼玉膏对这些蛋白均起到下调的作用。4.生物信息学分析,GO注释中差异蛋白的功能共有31种,包括生物过程15种、细胞构成9种、分子功能7种；KEGG分析发现主要代谢通路有5条,分别为Fc εRI信号通路、泛酸和辅酶A的生物合成、T细胞受体信号通路、ErbB受体信号通路以及鞘脂类代谢。结论：14种显著差异蛋白包括线粒体相关蛋白、代谢相关蛋白、生长分化相关蛋白、连接相关蛋白、催化相关的蛋白和信号传导相关蛋白。经过生物信息学分析,琼玉膏作用的靶蛋白可能在中性神经酰胺酶蛋白、植烷酸-辅酶A羟化酶相互作用类蛋白、RAS脒基释放蛋白2、SHC转运蛋白、双重特异性蛋白激酶7以及信号转导子和转录激活子5b这六种蛋白中,即Asah2、Phyhip1、Rasgrp2、Shc3、Map2k7、Stat5b六种基因表达的蛋白有成为琼玉膏延缓衰老作用靶标的可能,有待进一步深入研究。