小麦脱水素基因wzy1-2启动子的功能分析

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脱水素(dehydrin)属于LEA-Ⅱ家族(胚胎发育后期丰富蛋白,late embryogenesisabundant proteins),其分子量介于9-20kD,能够在植物胚胎发育后期以及受到低温、干旱、盐渍等逆境胁迫时表达。当植物受到干旱胁迫时,脱水素能够与膜脂结合防止胞内水分的过度缺失来维系细胞膜结构的稳定。脱水素是一类高亲水性蛋白,具有分子伴侣的作用,在植物受到水分胁迫时对蛋白质的结构起到稳定作用。本研究通过生物信息学软件对小麦脱水素基因wzy1-2启动子进行预测和分析,发现该启动子与逆境相关的顺式作用元件有:茉莉酸甲酯类响应元件(TGACG-motif)、干旱诱导响应元件(MBS)、脱落酸诱导响应元件(ABRE)、低温诱导响应元件(LTR)、水杨酸诱导响应元件(SARE)、赤霉素类物质响应元件(GARE)等。根据小麦脱水素基因wzy1-2启动子上顺式作用元件的分布情况,设计了7对5’端缺失启动子sp5(736bp)、sp6(541bp)、sp7(431bp)、sp8(395bp)、sp9(257bp)、sp10(184bp)、sp11(164bp),成功的构建了含有携带gus报告基因的重组表达载体pBI121。利用基因枪介导转基因技术成功的将7组重组表达载体转化到郑引1号小麦幼胚的愈伤组织中,并进行瞬时表达分析。根据GUS染色的组织化学分析和荧光定量分析的结果推测,wzy1-2启动子是一类诱导型启动子,其在ABA诱导时响应尤为明显,同时在水杨酸和赤霉素胁迫诱导时也会有大量表达,茉莉酸甲酯和干旱胁迫诱导时同样会有少量表达,而在低温诱导时基本不表达。
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