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目的：研究Th17/Treg细胞是否参与了主动脉瓣膜钙化形成及其促进瓣膜钙化发生发展的机制。方法：(一)、主动脉瓣膜分为两组(n=10)：1、对照组,瓣膜来自扩张型心肌病需要心脏移植的受体,排除有瓣膜组织病理改变者；2、钙化组,瓣膜来自单纯主动脉瓣膜钙化需行瓣膜置换术者,排除有风湿热及心内膜炎病史者。分别进行von kossa染色、免疫组织化学和western blot、RT-PCR分析,检测瓣膜组织内Th17/Treg细胞浸润情况及其比率。(二)、利用体外主动脉瓣膜间质细胞培养及Th17细胞分化诱导技术,把瓣膜间质细胞培养3-5代后,随机分为五组(n＝10)：1、对照组,细胞培养基中添加1ml RPMI-1640完全培养液；2、实验组Ⅰ：细胞培养基中添加1ml的Thl7细胞培养上清液；3、实验组Ⅱ：细胞培养基中添加1ml的Th17细胞培养上清液和人IL-17抗体(50ng/ml),用来阻断IL-17生物活性；4、实验组Ⅲ：细胞培养基中添加1ml的Th17细胞培养上清液和人IL-17抗体(50ng/ml)及人核因子-κB受体活化因子配基(10ng/ml),增加培养基中核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)浓度；5、实验组Ⅳ：细胞培养基中添加1ml的Th17细胞培养上清液和RANKL抗体(10ng/ml),用来阻断RANKL的生物活性。继续孵育48小时后,用细胞茜素红钙染色法检测五组瓣膜间质细胞钙化情况,western blot和RT-PCR检测五组瓣膜间质细胞碱性磷酸酶(ALP)及骨形态蛋白-2(BMP-2)的表达情况。结果：(一)、对照组无Th17/Treg细胞浸润；钙化组Th17/Treg细胞均有浸润,但Th17细胞浸润数量明显高于Treg细胞(19.70±2.67VS10.70±1.89; P=<0.01).(二)、五组瓣膜间质细胞中均见钙结节形成,但实验组I和实验组Ⅲ中钙结节形成较其它三组明显增多。实验组I瓣膜间质细胞表达ALP和BMP-2均明显增高,分别与对照组、实验组II、实验组Ⅳ比较均有显著性差异(0.743±0.053VS0.180±0.026, P=<0.01;0.901±0.059VS0.396±0.032, P=<0.01),(0.743±0.053VS0.249±0.030, P=<0.01;0.901±0.059VS0.421±0.031,P=<0.01),(0.743±0.053VS0.250±0.026, P=<0.01;0.901±0.059VS0.424±0.037, P=<0.01);实验组Ⅱ瓣膜间质细胞表达ALP和BMP-2较实验组Ⅲ降低,两组比较具有显著性差异(0.249±0.030VS0.717±0.063, P<0.01;0.421±0.031VS0.880±0.052, P<0.01)。结论：我们的研究首次证明了：(一). Thl7/Treg细胞参与了主动脉瓣膜钙化形成,钙化瓣膜组织内Th17细胞浸润程度明显高于Treg细胞。(二)、Th17细胞通过分泌IL-17,促进瓣膜组织内慢性炎症形成,同时还通过RANKL/RANK信号通路促进瓣膜间质细胞向成骨样细胞转化。调控Th17/Treg细胞比率可能会影响主动脉瓣膜钙化进程。