本文以玫瑰带腋芽茎段和幼嫩叶片为外植体,对玫瑰组织培养进行了系统的研究。旨在建立可用于工厂化繁殖的玫瑰微体快繁技术体系,并为玫瑰的分子育种及相关研究提供技术支持。一、在以玫瑰带腋芽茎段为外植体的微体快繁技术体系的建立中,文章对外植体的取材时间、不同灭菌处理方案的灭菌效果、外植体的褐变现象及不同培养阶段的褐变控制方法、组织培养过程中培养条件对组培苗的影响、多酚含量及多酚氧化酶活性与玫瑰组培苗褐变及生根的关系、驯化处理与移栽基质对移栽成活率的影响以及玫瑰组织培养的最佳初代、增殖、生根培养基等都进行了系统、细致的研究。结果发现:1.玫瑰组织培养的最佳取材时间是4月份。该时期外植体的污染率最低,启动率最高。2.以4月份的带腋芽茎段为外植体,最佳灭菌处理方案为T5处理,即75%乙醇1 min+0.1%升汞(添加吐温-20)10 min。3.植物生长调节物质对不同玫瑰品种初代接种启动率和平均生长量的影响均呈相同的变化规律。MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 0.4 mg/L为玫瑰初代培养最佳培养基。4.玫瑰不同品种、同一品种不同芽位的外植体在组培中褐变发生情况不同,但不同品种芽位的褐变度均呈“V”型变化,且峰值均在第4芽。1.5 g/L活性碳(AC)是初代培养和生根培养的最佳褐变抑制剂。0.2 g/L抗坏血酸(Vc)是增殖培养的最佳褐变抑制剂。添加AC的培养基中,组培苗的生长势强,叶色油绿,光泽好,苗木木质化程度相对较高,AC起到了壮苗的作用。5.植物生长调节物质对不同玫瑰品种组培苗的苗高和增殖有相同趋势的影响。适宜浓度的6-BA对玫瑰组培苗的增殖系数和苗高均有显著的促进作用,6-BA是影响玫瑰组培苗增殖的主要因素;NAA不是影响组培苗增殖的主要因素;GA3是影响组培苗增殖的重要因素。MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA3 0.8 mg/L是玫瑰增殖培养的最佳培养基。6.适宜的光照强度是玫瑰组培苗正常生长的必要条件。2000～3000LUX的光照强度是玫瑰组培的最佳光强范围。2000LUX的光强是保证组培苗正常生长的最低光照强度。3000LUX的光强是保证组培苗具有较高增殖系数的最高光照强度。7.从第6次继代开始,组培苗的增殖系数开始下降,此后随着继代次数的增多,组培苗的增殖系数持续下降。玫瑰工厂化繁殖过程中,必须定期对用于增殖培养的组培苗进行更新。8.玫瑰组培苗的褐变度对其生根指数有极显著负影响。不同玫瑰品种间的多酚含量、PPO活性与生根指数存在极显著差异。多酚含量与生根指数显著负相关,PPO活性与生根指数极显著负相关,PPO活性对组培苗生根的影响相对较大。玫瑰组培苗的PPO活性及生根指数与pH均有密切联系,PPO的最适pH为6.5,而其生根的最适pH为5.5。9. NAA对不同玫瑰品种组培苗生根有相同趋势的极显著影响。在试验所设置的浓度范围内IBA对组培苗生根的影响小于NAA。1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.5mg/L+AC 1.5g/L为玫瑰组培苗生根的最佳培养基。10.驯化处理可显著提高组培苗的移栽成活率,是玫瑰组培苗移栽前必不可少的过程。珍珠岩:蛭石:草炭=1:2:1的基质是玫瑰组培苗移栽的最佳基质。二、在以玫瑰幼嫩叶片为外植体的愈伤组织诱导及不定芽再生体系的建立中,文章对玫瑰叶片愈伤组织发生的动态过程进行了详细的描述,对暗培养、叶片接种部位、叶片接种方向、不同植物生长调节物质对叶片愈伤组织诱导的影响以及不同植物生长调节物质、暗培养对不定芽再生的影响,都进行了细致的研究。结果发现:1.离体叶片接种20d左右基部叶块的叶柄处,首先产生少量黄绿色愈伤组织,在随后的培养中愈伤组织逐渐分化为三种不同的类型,其中黄绿色、致密、颗粒状愈伤组织不需继代培养即可在不定芽诱导培养基上分化出不定芽。2.暗培养对接种叶片愈伤组织诱导有很大的影响。在本试验条件下,愈伤组织诱导的最佳暗培养时间为3w。3.同一叶片的不同部位再生愈伤组织的能力不相同。不同部位的再生能力依次为:叶基>叶中>叶尖。4.叶片接种方向对愈伤组织的诱导无明显影响。5. 2,4-D是影响玫瑰叶片愈伤组织诱导率和愈伤组织生长量的主要因素; 6-BA是影响愈伤质量的主要因素。诱导玫瑰叶片愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5 mg/L。6.暗培养不是玫瑰叶片愈伤组织再生不定芽的必要因素,但适当的暗培养有利于不定芽的再生。7.植物生长调节物质对玫瑰愈伤组织不定芽再生有很大的影响,TDZ是玫瑰叶片愈伤组织再生不定芽的必要因素。TDZ2.0mg/L+IBA0.1mg/L是玫瑰愈伤组织再生不定芽的最佳诱导培养基。