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目的：研究去甲斑蝥素(NCTD)与吴茱萸碱(EVO)联合用药对肝癌HepG2细胞增殖、周期凋亡的体外研究，以期为二者联合治疗肝癌提供理论依据。 方法：采用MTT方法检测去甲斑蝥素、吴茱萸碱及二者联合用药对肝癌HepG2细胞株的增殖影响;运用FCM技术检测两药联合诱导后对肝癌HepG2细胞株周期、凋亡和活性氧的影响;采用western blotting技术检测两药联合作用于肝癌HepG2细胞后Bcl-2和Bax蛋白的表达变化。 实验结果： 1、不同浓度梯度的NCTD，EVO作用于HepG2细胞后，细胞的生长情况受到不同程度的抑制，这种抑制作用与药物浓度和作用时间呈依赖关系，NCTD，EVO对HepG2细胞作用24 h，48 h，72 h的IC50值分别为177.6，102.1，76.3μmol/L和129.9，20.9，9.3μmol/L; 2、NCTD与EVO联合处理HepG2细胞时，EVO能明显的增强NCTD对癌细胞的抑制作用， CI均＜1，两者联合有协同效应，两药联合作用HepG2细胞48 h的IC50值为NCTD(38.1μmol/L)+EVO(7.6μmol/L); 3、与对照组及单独用药组比较，10μmol/L NCTD和2μmol/L EVO联合用药作用48h后，细胞周期阻滞在G2/M期的比例增加，G2/M期比例由EVO（36.13±1.63）％，NCTD（10.67±0.89）％上升至联合用药(73.42±1.92)％(P＜0.05); 4、40μmol/L NCTD和8μmol/L EVO联合诱导肝癌HepG2细胞48h，细胞凋亡率增加，凋亡率从单独用药EVO（15.78±3.08）％，NTCD（11.47±1.60）％增加至联合用药组的(21.86±2.70)％，药物组与对照组相比P＜0.05; 5、与对照组比较，HepG2细胞经40μmol/L NCTD、8μmol/L EVO以及NCTD联合EVO处理48h后活性氧表达升高(P＜0.05)。 6、40μmol/L NCTD和8μmol/L EVO联合48h后Bax的蛋白表达水平均明显提高，Bcl-2的表达水平呈下降趋势，同时，两者联合用药可使蛋白表达变化更加的明显(P＜0.05) 结论： 1、去甲斑蝥素和吴茱萸碱能抑制肝癌HepG2细胞生长，促进凋亡，两药对肝癌HepG2细胞有协同抑制效应。 2、NCTD与EVO联合使用可通过下调Bax/Bcl-2比例启动细胞凋亡，使细胞周期阻滞在G2/M期，提高胞内ROS水平，抑制肿瘤细胞的生长。