论文部分内容阅读
目的研究2，3-吲哚醌（2，3-dioxoindoline，ISA）对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡和端粒酶表达的影响。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞，将SH-SY5Y细胞随机分为对照组和ISA不同浓度(0、100、200、400μmol·L-1)处理组，采用Hochest33258荧光染色和琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡；采用Western blotting检测凋亡抑制基因bcl-2、凋亡基因bax蛋白表达的变化；采用RT-PCR检测加药后SH-SY5Y细胞端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA表达水平的变化。结果100、200、400μmol·L-1ISA处理SH-SY5Y细胞48h后，荧光染色可观察到明显的细胞凋亡的核浓缩、核聚集的形态变化；bcl-2蛋白表达逐渐减少（P＜0.05），各组间比较差别有统计学意义；bax蛋白表达水平未见明显变化（P＞0.05）；hTERTmRNA表达水平降低（P＜0.05），各组间差异比较有统计学意义；200、400μmol·L-1ISA处理SH-SY5Y细胞48h，琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯带。结论2，3-吲哚醌能明显诱导SH-SY5Y细胞凋亡，并在一定浓度范围内呈浓度依赖关系。在2，3-吲哚醌诱导SH-SY5Y细胞凋亡过程中，涉及细胞形态、DNA的断裂、bcl-2和bax蛋白水平的改变以及端粒酶逆转录酶hTERTmRNA水平的改变。2，3-吲哚醌可能通过下调bcl-2和hTERT表达诱导SH-SY5Y细胞凋亡，并在一定浓度范围内呈浓度依赖关系。本课题用SH-SY5Y细胞株作为靶细胞，研究2，3-吲哚醌对肿瘤细胞凋亡的影响，探讨新的凋亡诱导剂及诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的机制，具有理论和实际意义。2，3-吲哚醌在逐渐完善和研究基础之上，有望成为一种新型的抗肿瘤药物。