【摘 要】
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高浓度的NaCl可引起盐胁迫,进一步使植物的新陈代谢紊乱,包括K~+/Na~+比率的不平衡,渗透胁迫,离子毒害,对植物组织造成伤害。而Na~+/H~+逆向转运蛋白可以促使Na~+和H~+的跨膜
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高浓度的NaCl可引起盐胁迫,进一步使植物的新陈代谢紊乱,包括K~+/Na~+比率的不平衡,渗透胁迫,离子毒害,对植物组织造成伤害。而Na~+/H~+逆向转运蛋白可以促使Na~+和H~+的跨膜逆向运输,降低植物细胞中钠离子浓度的积累,抵御盐分胁迫,提高植物的耐盐性。对于植物Na~+/H~+逆向转运蛋白基因进行分子操作,有利于更深入的了解该基因,促进植物耐盐基因工程的发展.本研究课题以Na~+/H~+逆向转运蛋白家族中的SeNHX1为研究对象,使用了pBin121双元表达载体,pBin121含35S启动子片段,具有卡那霉素抗性和GFP绿色荧光蛋白标记基因,通过基因重组将SeNHX1与双元表达载体连接,获得pBin121-SeNHX1,所得到的表达质粒载体直接转入根癌农杆菌C58。实验的另一个方面是风铃花(Campanula medium)植株再生体系的建立。由于前人在风铃花组织培养这一研究方面的空白,可以说我们对风铃花组培体系的摸索是创新的。通过尝试2,4-D,6-BA,NAA等激素的不同组合,筛选出了愈伤诱导培养基,芽分化培养基,生根培养基的激素配比,最终建立了一套完整的风铃花组织培养体系,为下一步农杆菌侵染进行转基因操作奠定了基础。最后一个方面,运用农杆菌介导转化方法,使SeNHX1基因导入目标植物。对筛选出来的抗性植株进行初步的检测,包括荧光检测、PCR等方法与野生型植株进行对照。通过初步的检测表明,SeNHX1成功导入风铃花中。
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