基因组改组选育类球红细菌辅酶Q10高产菌株

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qingsong009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
从实验室保藏菌株中筛选出1株辅酶Q1o产生菌NM-FZ-47,辅酶Q1o产量为63.4mg/L。首先对辅酶Q1o测定方法进行研究,采用3种不同的测定方法分别测定辅酶Q1o,结果表明高效液相色谱法测定结果准确且重现性好,可作为菌种复筛的测定方法。紫外分光光度法误差极大,改良的紫外分光光度法误差相对较小且快速简便,可作为菌种初筛的测定手段。以类球红细菌NM-FZ-47为出发菌株,采用紫外线和NTG两种诱变手段,利用筛选因子叠氮钠、对羟基苯甲酸、罗红霉素及卡那霉素对突变菌株进行推理选育构建辅酶Q10正突变库。选择较出发菌株提高15%且稳定性较好的突变株UV-LH-37、UV-NaN3-44、NTG-LH-28、NTG-NaN3-17、NTG-PHB-54、 NTG-LN-67作为第一轮基因改组的出发菌株。类球红细菌原生质体制备与再生的研究结果表明:菌龄18h、溶菌酶浓度为0.75mg/mL.酶解时间30min、酶解温度35℃、0.6mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,此条件下制备率和再生率分别为92.1%和25.1%。类球红细菌原生质体融合条件研究结果表明:采用灭活法标记,紫外线处理时间为10mim、60℃水浴处理8min,原生质体灭活率可以达到100%;原生质体融合的最佳条件:35%PEG6000、Ca2+0.01mol/L、融合温度30℃、融合时间5min,融合率达到9.1×10-3。基因组改组选育过程中,通过3轮递推式融合选育出一株遗传稳定的重组子F3-40,其辅酶Q1o产量为118.26mg/L,较出发菌株NM-FZ-47提高了86.52%。对F3-40进行发酵优化,最佳发酵条件为:接种量为15%,初始pH为6.4,装液量40mL/250mL三角瓶;培养基中最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母粉;通过Plackett-Burman实验设计对培养基中9个因子进行筛选,获得3个重要影响成分:葡萄糖、谷氨酸和氯化铵。再利用响应面法对这三个组分进行3水平优化,得到最佳组合:谷氨酸6.98g/L、氯化铵5.15g/L、葡萄糖24.05g/L,在这个组合下,实验值为213.25mg/L,比优化前提高了80.32%,比出发菌株提高了236.75%。
其他文献
首先在Banach空间中给出了半变分不等式(HVI)的Levitin-Polyak适定性的概念.然后,给出了半变分不等式的Levitin-Polyak适定性的度量刻画.最后,讨论了半变分不等式HVI(A,f,j,K)的L
本试验为筛选适宜番茄秸秆堆肥处理的微生物菌剂,以番茄秸秆和鸡粪为原料,添加3种不同微生物菌剂,研究了其微生物的促腐效应。结果表明:添加微生物菌剂可以加速堆肥的腐熟,促
近年来,由于收入分配制度的变革,我国居民收入水平呈现上升态势,但同时也导致居民收入差距进一步拉大,最终消费率持续下降.针对这一事实,本文拟深入探讨收入分配对消费需求的
目的:探讨对接受腹腔镜胰十二指肠切除术的患者进行综合护理的效果。方法:将2017年1月至2018年1月期间在合肥市第二人民医院接受腹腔镜胰十二指肠切除术的50例患者随机分为A
中国梦不仅体现了社会主义理想的一般特征,而且体现了社会主义理想的中国化特征,即:实现中国梦必须走中国道路,实现中国梦必须弘扬中国精神,实现中国梦必须凝聚中国力量。中国梦是
首先介绍了国际标准组织在教学中显示设备尺寸与观看距离关系的研究。然后一方面结合汉字的特点与人眼视觉特性进行了理论推理与计算,另一方面开展了主观评价试验。实验结果
建设一体化信息政府非常必要.一是可以做到全国态势一目了然、实时掌握,不同层面人员可以获得恰到好处的信息;二是可以做到全国一盘棋,大幅提升执行效率,有效督促各级政府不
企业管理学在职业学校是一门难教难学的课程,如何提高企业管理教学的效果,是一个值得深入研究的课题.
对工程造价和成本进行有效的管理和控制,可以确保工程质量,提高施工企业的经济效益。建筑工程的造价管理和成本控制应当贯穿于工程项目全过程,即包括项目投资决策阶段、项目的设