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目的:研究TIGAR对乏氧人食管鳞癌细胞放射敏感性的影响。方法:1)检测不同食管鳞癌细胞株(ECA109、KYSE410、KYSE450)内TIGAR的线粒体定位水平。用细胞线粒体分离试剂盒来裂解上述食道癌细胞,通过Western blot技术检测各食道癌细胞株线粒体中TIGAR的表达水平,筛选表达最高及最低的食管鳞癌细胞进行后续实验。2)检测乏氧对食管癌细胞TIGAR的线粒体定位水平的影响。细胞培养于常氧或乏氧细胞培养箱(1%氧浓度)20小时后,通过Western blot技术检测常氧及乏氧培养环境下食管癌细胞内TIGAR的线粒体定位水平变化。3)研究TIGAR线粒体定位对乏氧食管鳞癌细胞细胞自噬水平和氧化应激的影响,分别通过过表达或敲除TIGAR,采用Western blot验证TIGAR线粒体定位水平的变化,通过改变TIGAR线粒体定位后运用流式细胞技术检测食管癌细胞的ROS水平;运用Western blot方法检测LC3-II、P62、Beclin-1这些自噬相关蛋白的变化。4)研究TIGAR线粒体定位对乏氧食管癌细胞辐射敏感性的影响。通过克隆形成实验来检测干扰或者过表达的TIGAR对乏氧食管鳞癌细胞的放射敏感性的影响。5)研究调控TIGAR线粒体定位水平后,对乏氧环境下的食管鳞癌细胞照射后DNA损伤、氧化应激以及自噬水平的影响。通过Western blot检测r-h2ax和自噬相关蛋白的表达以及流式细胞技术检测干扰或者过表达TIGAR对乏氧环境下照射引起的食管鳞癌细胞DNA损伤、ROS以及自噬水平的影响。结果:1.不同食管鳞癌细胞(ECA109、KYSE410、KYSE450)内TIGAR的线粒体定位水平不同,其中KYSE410细胞TIGAR在线粒体中的表达最高,KYSE450的表达最低。2.在乏氧培养条件下,食管鳞癌细胞中TIGAR在线粒体中的表达升高。3.干扰KYSE410食道癌细胞的TIGAR表达后,细胞内TIGAR线粒体定位水平降低,检测到食道癌细胞内ROS水平升高(P=0.009),Western blo t检测到细胞自噬水平增加;而当KYSE450食道癌细胞过表达TIGAR后,细胞内TIGAR线粒体定位水平升高,细胞的ROS水平降低(P=0.006),细胞自噬水平降低。4.在干扰KYSE410细胞TIGAR表达后,其细胞在乏氧条件下的辐射敏感性增加;而在KYSE450食道癌细胞过表达TIGAR后,其细胞在乏氧条件下辐射敏感性减弱。5.干扰KYSE410细胞TIGAR表达,增加了细胞照射后的DNA损伤、自噬水平及ROS水平(P=0.021)。而KYSE450食道癌细胞过表达TIGA R,降低了细胞照射后的DNA损伤、自噬水平及ROS水平(P=0.018)。结论:乏氧微环境下可以诱导食管鳞癌细胞中的TIGAR线粒体定位,从而降低食管鳞癌细胞的氧化应激和细胞自噬水平,减少细胞的DNA损伤,最终介导食管鳞癌细胞的乏氧辐射抵抗。