胃癌患者外周血及肿瘤微环境记忆性T细胞及其亚群的分布特征及其意义

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研究目的:作为T细胞免疫的主要群体,记忆性T细胞的特殊性及其在胃癌中的重要意义现在尚无定论。本研究的目的是探讨胃癌患者记忆性T细胞及其亚群的分布特征,观察胃癌患者与健康人记忆性T细胞分布的差异;探讨肿瘤局部浸润的记忆性T细胞的分布特征;并分析记忆性T细胞在外周血与肿瘤微环境中的分布与胃癌临床病理特征的关系;并进一步探讨外周血及肿瘤微环境中记忆性T细胞及其亚群与抗原提呈细胞——树突细胞DC分布的相关关系。方法:1、收集天津医科大学附属肿瘤医院2010年3月至2011年6月收治的胃癌患者82例,取术前及术后空腹外周静脉血,流式细胞仪检测在外周血中记忆性T细胞亚群(CD4+T效应性记忆T细胞,CD4+中央型记忆T细胞,CD8+效应型T细胞及CD8+中央型记忆T细胞)和树突状细胞亚群(DC1, DC2)的分布。同时抽取70例健康志愿者的外周静脉血作对照。收集同期天津医科大学附属肿瘤医院有完整资料的胃癌患者72例新鲜胃癌标本,网搓法制成单细胞悬液,流式细胞仪检测记忆性T细胞亚群和树突状细胞亚群的分布。2、检测胃癌患者外周血及微环境中记忆性T细胞及亚群的分布,同时检测健康对照组外周血中记忆性T细胞及其亚群的分布,比较两者的差异。比较胃癌患者在根治性切除术前后记忆性T细胞的分布变化,分析外科手术去除肿瘤负荷对记忆性T细胞分布的影响。分析胃癌患者外周血及肿瘤微环境中记忆性T细胞及其亚群分布与临床病理特征的关系。检测患者外周血及肿瘤微环境中抗原提呈细胞——树突细胞亚群(DCl及DC2)的分布,并探讨树突细胞分布与记忆性T细胞亚群的关系。结果:1、胃癌患者中CD4+Tm及CD8+Tm在总T细胞中所占的百分比比健康对照组明显降低,差异有统计学意义。胃癌患者外周血中CD4+Tcm及CD8+Tcm百分比显著低于健康对照组。但是胃癌患者CD4+Tem及CD8+Tem百分比显著高于健康对照组(P均<0.05)。2、CD4+Tcm及CD8+Tcm的百分比在根治性切除后明显升高,而CD4+Tem及CD8+Tem在根治性切除后明显降低。CD8+Tm的百分比在胃癌根治性切除术后显著降低(P均<0.05)。3、肿瘤微环境中的CD4+Tm及CD8+Tm的亚群的分布中,CD4+Tm以CD4+Tem为主,而CD8+Tm中CD8+Tcm及CD8+Tem两亚群的分布并无显著差异。4、无论在外周血或肿瘤微环境中CD4+Tm及CD8+Tm表达与胃癌分期呈明显相关,在Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者中CD4+Tm及CD8+Tm百分比较低,Ⅰ+Ⅱ期患者CD4+Tm及CD8+Tm百分比明显增高(P均<0.05)。在CD8+Tm的两个亚群中,CD8+Tcm与淋巴结转移与否及胃癌分期呈显著相关。有淋巴结转移的患者CD8+Tcm明显低于无淋巴结转移的胃癌患者。5、在外周血及肿瘤微环境中,CD4+Tcm及与CD8+Tcm与DC1细胞分布显著相关。而在肿瘤微环境中除CD4+Tcm及与CD8+Tcm外,CD4+Tm及CD8+Tm也与DC1的分布呈正相关。结论:1、在胃癌局部释放的免疫耐受相关因子及大量肿瘤抗原释放双重作用下胃癌患者记忆性T细胞形成了特征性分布。去除肿瘤负荷对记忆性T细胞有显著影响。2、记忆性T细胞的分布与胃癌分期密切相关。CD4+Tm及CD8+Tm、 CD4+Tcm及CD8+Tcm均与肿瘤分期呈负相关;而在肿瘤微环境中CD4+Tcm及CD8+Tcm也与分期呈负相关,而且CD8+Tcm的分布与淋巴结转移与否也密切相关,有淋巴结转移的患者其百分比显著降低。3、DC1是肿瘤微环境内提呈抗原的重要的抗原提呈细胞,其分布与肿瘤较好的预后及较早的疾病分期密切相关。它将抗原信息提呈给记忆性T细胞,对记忆性T细胞发挥杀伤功能有着重要意义。
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