两种天然食用色素对良性前列腺增生的抑制作用与机制研究

来源 :广东工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jojoy9912004
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背景:良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)常发生于中老年男性,属于进展性泌尿系统疾病之一,其组织学特征为前列腺过渡区域上的基质细胞和上皮细胞的非恶性的过度生长和增殖,会导致一系列下尿路症状,甚至威胁生命健康。目前,由于BPH发病的分子机制尚不明确,市面上针对BPH的治疗药物各有利弊,BPH发病率的逐年攀升以及发病趋于年轻化等,该疾病的研究具有重大的现实意义。现阶段治疗BPH的药物主要有两种,一类是α1-受体拮抗剂,可以快速缓解下尿路症状,但并不抑制前列腺增生的发展;另一类是5α-还原酶抑制剂如非那雄胺,能明显抑制前列腺增生,但会影响男性生理功能且长期使用会出现耐药性,因此针对BPH的植物类制剂越来越受到关注。通过调研发现有强抗氧化、抗炎、抗增殖等作用的活性物质对于前列腺疾病有非常好的疗效,同时许多研究也报道大量的天然食用色素如胡萝卜素、类胡萝卜素类、黄酮类色素等除了可以赋予食品药品诱人的色彩,自身也可发挥强大的生物活性(如抗氧化、抗炎、抗增殖、抑菌等)。目的:本课题主要目的是从细胞层面及动物层面研究两种天然食用色素(番茄红素与姜黄)对BPH的抑制作用,并探究其作用机制。为治疗BPH的药物或保健食品提供新原料,并对BPH的预防和治疗提供理论依据。内容及结果:(1)文献调研:通过文献调研,综述了BPH的发病机制和当前治疗药物的研究现状,确定了目标色素番茄红素(Ly)及姜黄(姜黄素(Cur)和姜黄油(CO))并概述其结构及生物活性。(2)细胞实验:采用CCK-8试剂盒测定Ly、Cur及CO对BPH-1细胞增殖的抑制作用。三种物质对BPH-1细胞均有明显抑制作用,IC50(Ly)400μg/m L为,IC50(Cur)为7.5μg/m L,IC50(CO)为40μg/m L。同时与Hacat细胞(代表正常细胞)进行对比,在三种物质的半抑制浓度下,均未显示出对Hacat细胞有明显毒性。采用Annexin V/PI双染色法测定了CO对BPH-1细胞凋亡的诱导作用。实验结果:在CO浓度为40μg/m L时,BPH-1细胞的总凋亡率为62.0±4.7%。(3)动物实验:使用250-300 g的SD雄性大鼠,去势后,连续4周进行皮下注射丙酸睾酮(5mg/kg/s.c.)构建良性前列腺增生模型,后进行灌胃给药4周治疗前列腺增生,同时造模操作不间断。实验结果:通过计算前列腺指数及组织病理学分析,证明Ly、Cur及CO在体内有明显的抑制前列腺增生的效果。(4)机理研究:主要采用酶联免疫,蛋白组化及免疫印迹实验来研究其治疗通路与靶点。通过对激素通路指标(双氢睾酮DHT,5α-还原酶),增生凋亡通路指标(Ki-67,CASP-8,9,3,Bc L-2,Bax),炎症通路指标(IL-1β,IL-6,COX-2,i NOS,TNF-α)以及NF-κB通路指标(P65,p-P65)的检测,最终确定Ly是通过调节细胞增生凋亡来抑制前列腺增生,Cur是通过降低炎症反应来改善前列腺增生的进展,而CO是通过调节体内激素水平,抑制5α-还原酶通路及NF-κB信号通路来调节相关指标从而达到治疗良性前列腺增生的目的。
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