小型化双波长光声光谱系统检测癌胚抗原的研究

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光声光谱技术是一种新型无损的样品分析方法,因其分析具有非破坏性且不受分析物质形态及散射光的影响,可以广泛地应用于高反射和不透明的样品分析。近年来,利用光声光谱法对生物样品的分析研究,引起了大家的广泛关注。本论文基于自制的光声池,搭建了微型化双波长光声光谱检测系统,同时结合适配体的特异性识别能力,实现了对癌胚抗原(CEA)的定量检测。第一章介绍了光声光谱分析法的原理、特点、发展和应用,以及金纳米粒子(AuNPs)在光声光谱检测中的应用等。第二章描述了所搭建的小型光声光谱检测系统和液态物质产生光声信号的原理。实验中,设计和制作了微型化液体光声池,选择波长为520 nm和638 nm的激光器作为光源,斩波器进行激光调制,麦克风接收声音信号,锁相放大器进行读取,搭建了完整的光声光谱检测系统,并利用其测定不同浓度AuNPs的光声信号,得到了良好的线性关系,相关系数R2为0.9984,验证了该系统进行定量分析的可行性。第三章利用所搭建的光声光谱检测系统进一步检测了癌症标记物CEA。将不同浓度的CEA与6 μmol L-1适配体混合反应,在该反应液中依次加入17.5 nmol L-1的AuNPs和0.9 mol L-1的KCl溶液。随着CEA浓度增加,反应液颜色由酒红色变成紫色,光声信号随之产生变化。根据520 nm和638 nm激光辐射下测得的光声信号比值,实现了对CEA的定量分析。在最佳实验条件下,该方法的线性范围为10~50 ng mL-1,相关系数R2为 0.9929,相对标准偏差 RSD 为 2.6%(n=9,30 ngmL-1),检出限为 3 ngmL-1(3σ,n=7)。为了评估该方法的选择性,利用所搭建的系统考察了共存物质的潜在干扰,实验证明了该方法对CEA具有较高的选择性。采用本方法对人体唾液中的CEA进行了加标回收实验,回收率在93~110%之间,说明该方法具有较好的准确性和可靠性。实验结果证明了该分析方法检测液体生物样品的可行性,为其他液体生物样品分析提供了一种有效的手段。
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