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目的：通过半胱氨酸(Hcy)诱导静脉内皮细胞损伤后赖氨酰氧化酶(LOX)的表达变化及a-硫辛酸(ALA)对LOX的调节作用,探讨ALA对内皮功能的保护作用及其机制,为ALA防治内皮细胞功能损伤提供理论依据。方法：1.将HUVEC-12细胞株进行人工传代培养。2.加入不同浓度Hcy、ALA培养不同时间,用MTT法测定细胞存活量。3.运用共聚焦显微镜观察不同浓度Hcy、ALA对细胞内活性氧(ROS)生成及清除情况。4.提取细胞RNA, RT-PCR后以MMP-2、LOX与β-actin的mRNA比值进行半定量分析。5.提取细胞蛋白,以LOX与β-actin勺OD比值进行定量分析。结果：1.Hcy对内皮细胞存活有明显抑制作用。不同浓度Hcy处理后,细胞明显受抑制,呈浓度依赖性(P<0.01)。经Hcy处理后加入不同剂量ALA,细胞存活量明显上升,不同组间差异具统计学意义(P<0.01)。2.Hcy能诱导内皮细胞产生ROS,胞内ROS含量随Hcy浓度增加而升高。以Hcy处理后分别加入不同剂量ALA,胞内ROS含量明显减少,不同组间差异具统计学意义(P<0.05)。3.Hcy呈浓度依赖性下调内皮细胞LOX表达及上调MMP-2 mRNA表达。RT-PCR结果提示予不同浓度Hcy处理后LOX mRNA表达明显减少,呈浓度依赖性(p<0.01)。MMP-2 mRNA表达随Hcy浓度增加而升高。应用LOX抑制剂BAPN后,MMP-2 mRNA表达明显增加。除Hcy中、高浓度组外,其余各组间差异均具统计学意义(P<0.01)。Western blot结果提示LOX表达随Hcy浓度增加而降低。不同组间差异具统计学意义(P<0.01)。4.ALA可抑制Hcy刺激引起LOX表达下调及MMP-2上调。RT-PCR结果提示经Hcy处理后分别加入不同剂量ALA,细胞LOX mRNA相对表达量呈上升趋势。MMP-2 mRNA表达较Hcy组降低,应用BAPN后,MMP-2 mRNA表达增加。不同组间差异具统计学意义(P<0.01)。Western blot结果提示经Hcy处理与加入ALA后比较,Hcy组细胞LOX蛋白明显低于ALA组。经重复测量方差分析,不同组间差异具统计学意义(P<0.05)。结论：1.ALA明显增高受损内皮细胞活性,提示ALA对内皮细胞具有保护作用。2.Hcy可通过增加细胞胞内ROS生成引起内皮细胞氧化损伤。予ALA干预后胞内ROS含量下降,提示ALA可通过减少内皮细胞ROS生成,改善细胞氧化应激损伤,达到保护内皮细胞的作用。3.Hcy引起内皮细胞MMP-2表达增加,可能是通过Hcy下调细胞LOX表达来实现的。提示Hcy可通过抑制细胞LOX表达引起MMP-2表达异常,促使ECM降解、改变血管壁弹性,从而导致内皮功能障碍,这可能是Hcy引起动脉粥样硬化的重要机制。4.ALA可干预内皮细胞中Hcy对LOX的表达抑制,并通过该抑制作用下调细胞MMP-2表达,提示ALA可通过上调LOX水平改善内皮功能,防止动脉粥样硬化的形成或进展。